血小板貯蔵顆粒の差動分泌

血小板には、3種類の分泌顆粒、密な顆粒、α顆粒、リソソームが含まれており、これらは異なる含有量によって特徴付けられます。高密度の顆粒とα顆粒分泌は、用量やアゴニストの種類に対する反応性が類似しているように見えますが、リソソーム分泌は、トロンビンなどの強いアゴニストの高用量でのみ観察されます。最近、フローサイトメトリーの出現により、顆粒タイプに特異的であると主張されている膜顆粒タンパク質の表面発現は、分泌のモニターとして使用されました。特にCD62（PADGEM）の発現は、固定によって分泌が停止されない方法によるβ-トロンボグロブリン放出の測定との比較に基づいて、α顆粒分泌と同義語になりました。現在、フィブリノーゲンの免疫測定法を開発し、固定停止に耐えることができ、同じ血小板上清中の濃度およびα顆粒マーカーの放出をゲルフィルタリング血小板のCD62およびCD63の発現と比較しました。0.04 U/mL未満のトロンビン濃度では、α顆粒フィブリノーゲンの分泌は、密な顆粒セロトニン、ATP、およびADPのそれよりも急速かつ定量的に大きくなりました。顆粒マーカー（内容）と血小板表面の顆粒膜マーカーの発現との分泌の比較により、CD62（P-セレクチン、パドゲム）の表面発現がフィブリノーゲン分泌に対応し、CD63は濃い顆粒の放出と合理的に相関することが示されました。コンテンツ。ゲルフィルトレーションの前に血小板をアセチルサリチル酸（ASA）で前処理し、0.01-0.03 U/mlの濃度範囲でGFPでトロンビン誘発濃度およびα顆粒放出を適度に阻害しました。トロンビン受容体アゴニストペプチド（TRAP）のアゴニスト効果は、β-ヘキソサミニダーゼ放出を除くすべての測定マーカーに対してトロンビンの効果に匹敵しました。

Platelets contain three types of secretory granules, dense granules, α-granules and lysosomes, which are characterized by their different contents. Dense granule and α-granule secretion appear to be similar in responsiveness to dose and types of agonists, whereas lysosomal secretion is observed only with higher doses of strong agonists such as thrombin. Recently, with the advent of flow cytometry, surface expression of membrane granule proteins, which are claimed to be specific for granule type, has come into use as a monitor for secretion. Expression of CD62 (PADGEM) in particular has become synonymous with α-granule secretion, based on comparisons with measurements of β-thromboglobulin release by a method in which secretion is not stopped by fixation. We have now developed an immunoassay for fibrinogen that tolerates fixation stopping and have compared the release of dense and α-granule markers in the same platelet supernatants with the expression of CD62 and CD63 in gel-filtered platelets. At thrombin concentrations less than 0.04 U/ml, secretion of α-granule fibrinogen was both more rapid and quantitatively greater than that of dense granule serotonin, ATP and ADP. Comparison of the secretion of granule markers (contents) with the expression of granule membrane markers on the platelet surface showed that surface expression of CD62 (P-selectin, PADGEM) corresponded to fibrinogen secretion, and CD63 correlated reasonably well with the release of dense granule contents. Pretreatment of platelets with acetylsalicylic acid (ASA) before gel-filtration moderately inhibited thrombin-induced dense and α-granule release in GFP at a concentration range of 0.01-0.03 U/ml. The agonist effect of a thrombin receptor agonist peptide (TRAP) was comparable to that of thrombin with respect to all measured markers except for β-hexosaminidase release, which was significantly less with TRAP.