マウス胚由来のICM細胞のガラス化：胚性幹細胞ポテンシャルを保存するためのツール？

目的：Vitrificationテクノロジーは、最初に実行可能なESCラインを確立することなく、胚由来の幹細胞を保存するための新しい機会を提供します。この研究では、ガラス化を使用して凍結除去ICM細胞の実現可能性をテストします。 材料と方法：マウス胚からのICMは、HSVストローまたはcryoloopsで分離され、ガラス化されました。温暖化すると、ガラス化されたICMは培養され、愛着と形態が観察されました。コロニーは3〜6日ごとに慣れていました。ICMSおよびICM由来のESCコロニーは、幹細胞特異的マーカーの発現についてテストされました。 結果：cryoloopとHSVストローの両方で硝子体になったICMは、生存率が高かった。ICM由来のESCは、いくつかの通路で未分化のままであり、典型的な幹細胞マーカーの発現を実証しました。SSEA-1、SOX-2、10月4日、アルカリホスファターゼ。 結論：これは、孤立したICMのガラス化の成功とその後のESCコロニーの導出に関する最初のレポートです。分離されたICMのガラス化は、「幹細胞源」材料を保存するための新しいアプローチです。

PURPOSE: Vitrification technology presents new opportunities for preservation of embryo derived stem cells without first establishing a viable ESC line. This study tests the feasibility of cryopreserving ICM cells using vitrification. MATERIALS AND METHODS: ICMs from mouse embryos were isolated and vitrified in HSV straws or on cryoloops. Upon warming, the vitrified ICMs were cultured and observed for attachment and morphology. Colonies were passaged every 3-6 days. ICMs and ICM-derived ESC colonies were tested for expression of stem cell specific markers. RESULTS: ICMs vitrified on both the cryoloop and the HSV straw had high survival rates. ICM derived ESCs remained undifferentiated for several passages and demonstrated expression of typical stem cell markers; SSEA-1, Sox-2, Oct 4 and alkaline phosphatase. CONCLUSION: This is the first report on successful vitrification of isolated ICMs and the subsequent derivation of ESC colonies. Vitrification of isolated ICMs is a novel approach for preservation of the "stem cell source" material.