グラム陰性細菌variovorax paradoxus株B4によるメルカプト吸着性の好気性分解

グラム陰性細菌のバリオヴォラックスパラドキス株B4は、中溶性および好気性条件下で土壌から分離され、メルカプト核（MS）の未知の異化を解明しました。MSでの成長中、この株はかなりの量の硫酸塩を培地に放出しました。TN5 :: Mob誘発性変異誘発は首尾よく採用され、MSを炭素源として使用することができない9つの独立した変異体が生成されました。これらの変異体のうち6つでは、TN5 :: MOB挿入は、モリブデン（MO）補因子生合成タンパク質（MOEA）をコードする推定遺伝子にマッピングされました。さらに2つの変異体では、TN5 :: MOB挿入を、推定モリブドプテリン（MPT）酸化還元酵素をコードする遺伝子にマッピングされました。野生型とは対照的に、これらの8つの変異体もタウリンに成長を示さなかった。別の変異体では、3-ヒドロキシアシル - コエンザイムを推定してエンコードする遺伝子が、トランスポゾン挿入により破壊されました。唯一の炭素および硫黄源としてMSで栽培された野生型細胞の細胞内分別により、MPT酸化還元酵素活性は細胞質画分のみで検出されました。唯一の炭素源としてコハク酸塩、タウリン、またはグルコン酸塩で成長した細胞は、活性やはるかに低い活動を示しませんでした。TN5 :: Mob誘発変異体ICR6の細胞質画分におけるMPT酸化還元酵素活性は、野生型と比較して3倍低かった。したがって、V。paradoxus株B4におけるMS異化の新しい経路が提案されています：（i）MPT酸化還元酵素は、最初にMSのスルフィノソウシネート（コハク酸塩とスルフィーノ基で構成される推定有機硫黄化合物）に変換を触媒し、その後スルホ糖に触媒します酸素原子の連続した移動、（II）硫酸塩をオキサロ酢酸および亜硫酸塩に切断し、（III）亜硫酸塩を硫酸塩に酸化します。

The Gram-negative bacterium Variovorax paradoxus strain B4 was isolated from soil under mesophilic and aerobic conditions to elucidate the so far unknown catabolism of mercaptosuccinate (MS). During growth with MS this strain released significant amounts of sulfate into the medium. Tn5::mob-induced mutagenesis was successfully employed and yielded nine independent mutants incapable of using MS as a carbon source. In six of these mutants, Tn5::mob insertions were mapped in a putative gene encoding a molybdenum (Mo) cofactor biosynthesis protein (moeA). In two further mutants the Tn5::mob insertion was mapped in the gene coding for a putative molybdopterin (MPT) oxidoreductase. In contrast to the wild type, these eight mutants also showed no growth on taurine. In another mutant a gene putatively encoding a 3-hydroxyacyl-coenzyme A dehydrogenase (paaH2) was disrupted by transposon insertion. Upon subcellular fractionation of wild-type cells cultivated with MS as sole carbon and sulfur source, MPT oxidoreductase activity was detected in only the cytoplasmic fraction. Cells grown with succinate, taurine, or gluconate as a sole carbon source exhibited no activity or much lower activity. MPT oxidoreductase activity in the cytoplasmic fraction of the Tn5::mob-induced mutant Icr6 was 3-fold lower in comparison to the wild type. Therefore, a new pathway for MS catabolism in V. paradoxus strain B4 is proposed: (i) MPT oxidoreductase catalyzes the conversion of MS first into sulfinosuccinate (a putative organo-sulfur compound composed of succinate and a sulfino group) and then into sulfosuccinate by successive transfer of oxygen atoms, (ii) sulfosuccinate is cleaved into oxaloacetate and sulfite, and (iii) sulfite is oxidized to sulfate.