グリコーゲン生合成におけるグリコーゲンの役割に関するさらなる研究

グリコーゲン/皮肉溶類分画で140,000 x gで堆積した、摂食、24時間の飢vedまたはアロキサン糖尿病のウサギから調製された骨格筋抽出物のグリコゲニンの約90％。したがって、グリコーゲン/皮質皮質のグリコーゲンは、グリコーゲンに共有結合し、筋細胞質網状体と関連していません（共有または非共有的に）結合します。グリコーゲン合成酵素の同じ割合もグリコーゲン/サルコベシクル画分で回収され、グリコーゲン分解により溶解し、グリコーニンと共培養して、これらのタンパク質間の1：1の複合体で構成されるヘテロダイマーを生成しました。したがって、グリコーゲン合成酵素とグリコゲニンは、骨格筋の等モル量で存在し、in vivoでのグリコーゲンの各分子に関連する1つのグリコーゲン合成酵素触媒サブユニットが1つあります。グリコーゲンとグリコーゲンシンターゼは、グリコーゲンの分解により筋肉サイトゾルに放出されたため、最初は複合体を形成しませんでした。これは、筋肉のサイトゾルがグリコーゲンとグリコーゲンシンターゼの関連を調節することによりグリコーゲンの生合成を調節する因子を含む可能性があることを示唆しています。グリコーニンに複合したグリコーゲンシンターゼのみが、グリコーニンとMn2+およびミクロモル濃度のUDP-グルコースのインキュベーションによって形成されたプライマーを伸ばすことができ、グリコーゲン生合成のこの複合体の重要な重要性を示しています。

About 90% of the glycogenin in skeletal muscle extracts prepared from fed, 24-h starved or alloxan-diabetic rabbits sedimented at 140,000 x g with the glycogen/sarcovesicular fraction, from which it was released by glycogenolysis, but not by 1% SDS. Glycogenin in the glycogen/sarcovesicular fraction is therefore bound covalently to glycogen, and not associated (covalently or non-covalently) with the sarcoplasmic reticulum. The same proportion of glycogen synthase was also recovered in the glycogen/sarcovesicle fraction, was solubilised by glycogenolysis, and copurified with glycogenin to yield a heterodimer composed of a 1:1 complex between these proteins. Glycogen synthase and glycogenin are therefore present in equimolar amounts in skeletal muscle and there is an average of one glycogen synthase catalytic subunit associated with each molecule of glycogen in vivo. Glycogenin and glycogen synthase released into the muscle cytosol by degradation of glycogen did not form a complex initially, and only 50% reassociation took place after storage for several hours or overnight dialysis. This suggests that the muscle cytosol may contain a factor(s) which regulates glycogen biogenesis by modulating the association of glycogenin and glycogen synthase. Only glycogen synthase that was complexed to glycogenin was capable of elongating the primer formed by incubation of glycogenin with Mn2+ and micromolar concentrations of UDP-glucose, demonstrating the critical importance of this complex for glycogen biogenesis.