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Saccharomyces cerevisiaeイニシエーターTRNAの配列に対応する75ユニットの長いオリゴリボヌクレオチドは、化学的に合成されました。粗RNAを精製し、RNA配列決定技術によって配列を検証しました。特に有用な精製ステップは、BNDセルロースの疎水性クロマトグラフィーを含んでいました。精製されたRNAは、真正なイニシエーターTRNA(MET)サンプルの28%にアミノアシル化され、タレオニルをゼロとスレオニル化し、大腸菌のネイティブTRNA(FMET)で観察されたレベルの76%になります。
Saccharomyces cerevisiaeイニシエーターTRNAの配列に対応する75ユニットの長いオリゴリボヌクレオチドは、化学的に合成されました。粗RNAを精製し、RNA配列決定技術によって配列を検証しました。特に有用な精製ステップは、BNDセルロースの疎水性クロマトグラフィーを含んでいました。精製されたRNAは、真正なイニシエーターTRNA(MET)サンプルの28%にアミノアシル化され、タレオニルをゼロとスレオニル化し、大腸菌のネイティブTRNA(FMET)で観察されたレベルの76%になります。
A 75-unit long oligoribonucleotide corresponding to the sequence of the Saccharomyces cerevisiae initiator tRNA was synthesized chemically. The crude RNA was purified, and the sequence was verified by RNA sequencing techniques. A particularly useful purification step involved hydrophobic chromatography on BND-cellulose. The purified RNA could be aminoacylated to 28% of a bona fide initiator tRNA(Met) sample and threonylated to 76% of the level observed with native tRNA(fMet) from E. coli.
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