ヒト膵臓細胞のゲムシタビン（DFDCYD）への化学療法における均衡ヌクレオシド輸送体2の血漿膜の破壊局在

ヌクレオシドピリミジンアナログゲムシタビンは、進行膵臓癌の緩和において最も効果的な単一剤ですが、ゲムシタビン治療に対する細胞耐性は臨床シーンの大きな問題です。ゲムシタビンへの化学療法の原因となる分子メカニズムを明確にするために、シチジンデアミナーゼ（CDA）、デオキシシチジンキナーゼ（DCK）、5'-ヌクレオチダーゼ（NT5）、5'-ヌクレオチダーゼ（NT5）、均衡ヌクレオシドトランスポーター1および2（ENT1およびENT2）を含む重要な酵素のmRNA発現、DCMPデアミナーゼ（DCMPK）、リボヌクレオチド還元酵素M1およびM2（RRM1およびRRM2）、チミジル酸シンターゼ（TS）およびCTPシンターゼ（CTPS）を調べました。ゲムシタビンの細胞間摂取は、ENT1およびENT2の機能障害により、化学療法施設の細胞株で非常に損なわれました。ENT1およびENT2のタンパク質発現とそのタンパク質コーディング配列は変更されませんでした。免疫組織化学的およびウエスタンブロット分析により、原形質膜上のENT2の局在が破壊されたことが明らかになりました。これらのデータは、ENT2の破壊された局在がゲムシタビンの摂取障害の原因の1つであり、ゲムシタビンへの化学療法施設の増加をもたらすことを示唆しています。

Although the nucleoside pyrimidine analogue gemcitabine is the most effective single agent in the palliation of advanced pancreatic cancer, cellular resistance to gemcitabine treatment is a major problem in the clinical scene. To clarify the molecular mechanisms responsible for chemoresistance to gemcitabine, mRNA expression of the key enzymes including cytidine deaminase (CDA), deoxycytidine kinase (dCK), 5'-nucleotidase (NT5), equilibrative nucleoside transporter 1 and 2 (ENT1 and ENT2), dCMP deaminase (dCMPK), ribonucleotide reductase M1 and M2 (RRM1 and RRM2), thymidylate synthase (TS) and CTP synthase (CTPS) was examined. The interacellular uptake of gemcitabine was greatly impaired in the chemoresistant cell lines due to dysfunction of ENT1 and ENT2. Protein expression of ENT1 and ENT2 and their protein coding sequences were not altered. Immunohistochemical and western blot analyses revealed that localization of ENT2 on the plasma membrane was disrupted. These data suggest that the disrupted localization of ENT2 is one of causes of the impaired uptake of gemcitabine, resulting in a gain of chemoresistance to gemcitabine.