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この研究では、ヤギ卵胞の発達のさまざまな段階におけるFSH受容体（FSHR）の発現を評価し、培養時代に濃度の増加を添加することが、in vitro培養カプリン前卵胞の生存、成長、および胞状形成に影響するかどうかを調査しました。FSHRの発現は、リアルタイムRT-PCRを使用して卵胞を培養する前後に分析されました。培養では、卵巣毛包前卵胞（≥150μM）を卵巣断片から分離し、α-MEM+単独で18日間培養するか、組換えFSH（RFSH：100または1000 ng/mL）に関連するか、または増加を増加させるα-MEM+培養期間を通じてFSHの濃度：（a）シーケンシャル培地1：FSH 100 ng/ml（0〜6日目）、FSH 500 ng/ml（6日目から12日目）、FSH 1000 ng/ml（日から12〜18）;（b）シーケンシャル培地2：FSH 500 ng/ml（0から9日目）および1000 ng/ml（9日目から18日目）。卵胞の発達は、胞状空洞の形成、卵胞および卵母細胞の成長、および積雲卵母細胞の複合体の健康に基づいて評価されました。孤立したカプリン卵胞におけるFSHRの発現は、前西部から洞相に増加しました。培養に関して、18日後、順次培地1は濾胞生存、洞形成、卵母細胞押出の減少を促進しました。両方のシーケンシャルメディアは、他の治療法と比較して、より高いマイオティクス再開率を促進しました。結論として、FSHの濃度の増加（シーケンシャル培地）の添加は、カプリン前部卵胞のin vitro発達に大きな影響を与えます。
この研究では、ヤギ卵胞の発達のさまざまな段階におけるFSH受容体（FSHR）の発現を評価し、培養時代に濃度の増加を添加することが、in vitro培養カプリン前卵胞の生存、成長、および胞状形成に影響するかどうかを調査しました。FSHRの発現は、リアルタイムRT-PCRを使用して卵胞を培養する前後に分析されました。培養では、卵巣毛包前卵胞（≥150μM）を卵巣断片から分離し、α-MEM+単独で18日間培養するか、組換えFSH（RFSH：100または1000 ng/mL）に関連するか、または増加を増加させるα-MEM+培養期間を通じてFSHの濃度：（a）シーケンシャル培地1：FSH 100 ng/ml（0〜6日目）、FSH 500 ng/ml（6日目から12日目）、FSH 1000 ng/ml（日から12〜18）;（b）シーケンシャル培地2：FSH 500 ng/ml（0から9日目）および1000 ng/ml（9日目から18日目）。卵胞の発達は、胞状空洞の形成、卵胞および卵母細胞の成長、および積雲卵母細胞の複合体の健康に基づいて評価されました。孤立したカプリン卵胞におけるFSHRの発現は、前西部から洞相に増加しました。培養に関して、18日後、順次培地1は濾胞生存、洞形成、卵母細胞押出の減少を促進しました。両方のシーケンシャルメディアは、他の治療法と比較して、より高いマイオティクス再開率を促進しました。結論として、FSHの濃度の増加（シーケンシャル培地）の添加は、カプリン前部卵胞のin vitro発達に大きな影響を与えます。
This study evaluated the expression of FSH receptors (FSHR) in the different stages of goat follicle development and investigated whether the addition of increasing concentrations of FSH throughout the culture period influences the survival, growth and antral formation of in vitro-cultured caprine preantral follicles. The expression of FSHR was analysed before and after culturing follicles using real-time RT-PCR. For the culture, preantral follicles (≥150 μm) were isolated from ovarian fragments and cultured for 18 days in α-MEM+ alone or associated with recombinant FSH (rFSH: 100 or 1000 ng/ml), or in α-MEM+ supplemented with increasing concentrations of FSH throughout culture periods as follows: (a) sequential medium 1: FSH 100 ng/ml (from day 0 to 6), FSH 500 ng/ml (from day 6 to 12) and FSH 1000 ng/ml (from day 12 to 18); and (b) sequential medium 2: FSH 500 ng/ml (from day 0 to 9) and 1000 ng/ml (from day 9 to 18). Follicle development was evaluated on the basis of antral cavity formation, follicular and oocyte growth, and cumulus-oocyte complex health. The expression of FSHR in isolated caprine follicles increased from the preantral to antral phase. Regarding the culture, after 18 days, sequential medium 1 promoted follicular survival, antrum formation and a reduction in oocyte extrusion. Both sequential media promoted a higher rate of meiotic resumption compared with the other treatments. In conclusion, the addition of increased concentrations of FSH (sequential medium) has a significant impact on the in vitro development of caprine preantral follicles.
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