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液体クロマトグラフィータンデム質量分析（LC-MS/MS）は、ヒト血漿および尿中の非共役および全総（共役プラス非共役）S-Equolを測定するための方法を開発および検証しました。RおよびSエナンチオマーの分離は、エタノール/ヘキサン移動相成分を使用して通常の位相モードで動作するChiracel OJ-Hカラムで達成されました。負のイオンエレクトロスプレーによるS-エロオールのイオン化により、[M-H]（ - ）イオンが生成され、その応答は水酸化アンモニウムのポスト柱添加によって増強されました。トリプルステージ四重極質量分析計を使用して、解離遷移m/z 241→m/z 121（S-equol）およびm/z 245→m/z 123（equol-d（4））から生成されたイオン電流を測定しました。。総S-Equolの測定には、サンプルとスルファターゼおよびグルクロニダーゼとのインキュベーションを含む追加の脱任体ステップが含まれていました。非共役および合計S-Equolの両方の平均回復は85％であり、観察可能なマトリックス効果はありませんでした。0.025ng/mlから10ng/ml（血漿）および0.20ng/mlから200ng/ml（尿）までの非結合S-Equolの線形性が確立されました。機会あたりの変動の平均係数と精度は、S-Equolの理論濃度の±15％以内でした。この方法は、3人の正常な健康なボランティアに対してS-Equolの単一20 mg用量の経口投与後のヒト血漿中のS-Equolの薬物動態を測定するために使用されました。
液体クロマトグラフィータンデム質量分析（LC-MS/MS）は、ヒト血漿および尿中の非共役および全総（共役プラス非共役）S-Equolを測定するための方法を開発および検証しました。RおよびSエナンチオマーの分離は、エタノール/ヘキサン移動相成分を使用して通常の位相モードで動作するChiracel OJ-Hカラムで達成されました。負のイオンエレクトロスプレーによるS-エロオールのイオン化により、[M-H]（ - ）イオンが生成され、その応答は水酸化アンモニウムのポスト柱添加によって増強されました。トリプルステージ四重極質量分析計を使用して、解離遷移m/z 241→m/z 121（S-equol）およびm/z 245→m/z 123（equol-d（4））から生成されたイオン電流を測定しました。。総S-Equolの測定には、サンプルとスルファターゼおよびグルクロニダーゼとのインキュベーションを含む追加の脱任体ステップが含まれていました。非共役および合計S-Equolの両方の平均回復は85％であり、観察可能なマトリックス効果はありませんでした。0.025ng/mlから10ng/ml（血漿）および0.20ng/mlから200ng/ml（尿）までの非結合S-Equolの線形性が確立されました。機会あたりの変動の平均係数と精度は、S-Equolの理論濃度の±15％以内でした。この方法は、3人の正常な健康なボランティアに対してS-Equolの単一20 mg用量の経口投与後のヒト血漿中のS-Equolの薬物動態を測定するために使用されました。
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) methods for the determination of unconjugated and total (conjugated plus unconjugated) S-equol in human plasma and urine were developed and validated. The separation of R and S enantiomers was achieved with a Chiracel OJ-H column operated in a normal phase mode using ethanol/hexane mobile phase components. Ionization of S-equol by negative ion electrospray generated the [M-H](-) ion whose response was augmented by post-column addition of ammonium hydroxide. A triple stage quadrupole mass spectrometer was used to measure the ion current generated from the dissociative transitions m/z 241→m/z 121 (S-equol) and m/z 245→m/z 123 (equol-d(4)). The determination of total S-equol included an additional deconjugation step involving incubation of the sample with sulfatase and glucuronidase. Average recovery for both unconjugated and total S-equol was 85% with no observable matrix effects. Linearity was established for unconjugated S-equol from 0.025ng/mL to 10ng/mL (plasma) and 0.20ng/mL to 200ng/mL (urine). The average coefficient of variation and accuracy per occasion was within ±15% of the theoretical concentration of S-equol. The method was used to measure the pharmacokinetics of S-equol in human plasma after an oral administration of a single 20mg dose of S-equol to three normal healthy volunteers.
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