スーパーフォルダーGFPは、SECトランスロコンを介してターゲットを絞った場合、酸化環境で蛍光です

遺伝的にエンコードされた蛍光タンパク質（FPS）を使用して、生細胞のタンパク質を研究する能力は、細胞生物学に革新されました（1-3）。研究者は、色の虹色の特定の生物と細胞内環境のための多数のFPバイオセンサーと最適化されたFPを作成しました（4,5）。しかし、真核生物小胞体（ER）や細菌のペリプラズムなどの酸化環境でFPSを発現すると、折りたたみが損なわれる可能性があり、それにより蛍光が防止されます（6,7）。緑色の蛍光タンパク質（EGFP）のかなりの割合は、ER（6）およびEGFPに非蛍光混合ジスルフィドを形成するためにオリゴマー化して、Secyegトランスロコン（7）を介して標的にされた場合、ペリプラズムに蛍光を蛍光しません。これらの障害を克服するために、スーパーフォルダーGFP（SFGFP）の非常に効率的な折りたたみ能力を利用しました（8）。ここでは、SFGFPがERおよびマルトース結合タンパク質（MBP）シグナル配列（PERI）-SFGFP（9）にジスルフィド結合オリゴマーを形成しないと報告しています。したがって、SFGFPは、酸化環境の居住タンパク質を研究するための重要な研究ツールです。

The ability to study proteins in live cells using genetically encoded fluorescent proteins (FPs) has revolutionized cell biology (1-3). Researchers have created numerous FP biosensors and optimized FPs for specific organisms and subcellular environments in a rainbow of colors (4,5). However, expressing FPs in oxidizing environments such as the eukaryotic endoplasmic reticulum (ER) or the bacterial periplasm can impair folding, thereby preventing fluorescence (6,7). A substantial fraction of enhanced green fluorescent protein (EGFP) oligomerizes to form non-fluorescent mixed disulfides in the ER (6) and EGFP does not fluoresce in the periplasm when targeted via the SecYEG translocon (7). To overcome these obstacles, we exploited the highly efficient folding capability of superfolder GFP (sfGFP) (8). Here, we report sfGFP does not form disulfide-linked oligomers in the ER and maltose-binding protein (MBP) signal sequence (peri)-sfGFP (9) is brightly fluorescent in the periplasm of Escherichia coli. Thus, sfGFP represents an important research tool for studying resident proteins of oxidizing environments.