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5種類のプロモーターが、PHA産生菌菌菌における調節された遺伝子発現のツールとして評価されました。レポーター遺伝子GFPの発現が、大腸菌の大腸菌、またはPHAC1のプロモーター領域に由来するP（LAC）、P（TAC）、またはP（悪い）によって制御されるいくつかの広いホスト範囲発現ベクターが構築されました（PHAC（PHAC））またはC. necatorに由来するPHAP1（P（PHAP））。次に、細胞をフルクトースまたは大豆油で成長させたときに、構築されたベクトルを抱えるC. necator株でGFP発現プロファイルを決定しました。P（LAC）、P（TAC）、P（PHAC）、およびP（PHAP）媒介構成遺伝子発現があり、その中でP（TAC）が最も強力なプロモーターでした。Laci-P（TAC）は、おそらくC. necatorがIPTGを摂取できないため、イソプロピル-β-D-チオガラクトピラノシド（IPTG）を添加した後でも完全に機能しませんでした。ARAC-P（悪い）による遺伝子発現は、培地でのL-アラビノース濃度の変化によって調節される可能性がありますが、P（3HB）産生速度は組換えでわずかに減少しました。PHAR-P（PHAP）は、P（3HB）蓄積と密接に結合した発現プロファイルを示し、PHAバイオソシンシス期に特異的に遺伝子発現のためにPHAR-P（PHAP）を抱えるベクターの適用を示唆しています。これらのプロモーターの特性は、C。NecatorのPHA生合成の効果的な工学に役立つと予想されていました。
5種類のプロモーターが、PHA産生菌菌菌における調節された遺伝子発現のツールとして評価されました。レポーター遺伝子GFPの発現が、大腸菌の大腸菌、またはPHAC1のプロモーター領域に由来するP（LAC）、P（TAC）、またはP（悪い）によって制御されるいくつかの広いホスト範囲発現ベクターが構築されました（PHAC（PHAC））またはC. necatorに由来するPHAP1（P（PHAP））。次に、細胞をフルクトースまたは大豆油で成長させたときに、構築されたベクトルを抱えるC. necator株でGFP発現プロファイルを決定しました。P（LAC）、P（TAC）、P（PHAC）、およびP（PHAP）媒介構成遺伝子発現があり、その中でP（TAC）が最も強力なプロモーターでした。Laci-P（TAC）は、おそらくC. necatorがIPTGを摂取できないため、イソプロピル-β-D-チオガラクトピラノシド（IPTG）を添加した後でも完全に機能しませんでした。ARAC-P（悪い）による遺伝子発現は、培地でのL-アラビノース濃度の変化によって調節される可能性がありますが、P（3HB）産生速度は組換えでわずかに減少しました。PHAR-P（PHAP）は、P（3HB）蓄積と密接に結合した発現プロファイルを示し、PHAバイオソシンシス期に特異的に遺伝子発現のためにPHAR-P（PHAP）を抱えるベクターの適用を示唆しています。これらのプロモーターの特性は、C。NecatorのPHA生合成の効果的な工学に役立つと予想されていました。
Five kinds of promoters were evaluated as tools for regulated gene expression in the PHA-producing bacterium Cupriavidus necator. Several broad-host-range expression vectors were constructed by which expression of a reporter gene gfp was controlled by P(lac), P(tac), or P(BAD) derived from Escherichia coli, or promoter regions of phaC1 (P(phaC)) or phaP1 (P(phaP)) derived from C. necator. Then, the gfp-expression profiles were determined in C. necator strains harboring the constructed vectors when the cells were grown on fructose or soybean oil. P(lac), P(tac), P(phaC), and P(phaP ) mediated constitutive gene expression, among which P(tac) was the strongest promoter. lacI-P(tac) was not thoroughly functional even after addition of isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside (IPTG), probably due to inability of C. necator to uptake IPTG. Gene expression by araC-P(BAD) could be regulated by varying L-arabinose concentration in the medium, although P(3HB) production rate was slightly decreased in the recombinant. phaR-P(phaP) exhibited an expression profile tightly coupled with P(3HB) accumulation, suggesting application of the vector harboring phaR-P(phaP ) for gene expression specific at the PHA-biosynthesis phase. The properties of these promoters were expected to be useful for effective engineering of PHA biosynthesis in C. necator.
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