（Na（+）+K（+）） - 心筋細胞におけるATPaseを介したCa2+流入の活性化と阻害の機構的区別

（Na（+）+K（+）） - ATPase（NKA）は、心臓の陽性変力性を媒介します。広範な研究により、逆モードNA（+）/Ca（2+） - 交換器（NCX）が、心臓グリコシドによるNKA誘発陽性の変位体の阻害を通じて細胞内Ca（2+）濃度を増加させる上で重要な役割を果たすことが実証されています。NKA誘発陽性の変力性の活性化におけるNCX機能モードの性質についてはほとんど知られていない。ここでは、単離されたラット筋細胞の（45）Ca流入に対するNKA活性化因子SSA412抗体の効果を調べ、NCX逆モード阻害剤であるKB-R7943がNKA誘発性（45）CAの活性化を阻害できないことを発見しました。、リバースモードNCXを介したCa（2+）の流入がこのプロセスを媒介しないことを示唆しています。L型Ca（2+）チャネル（LTCC）阻害剤であるニフェジピンは、NKA誘導（45）Ca流入の活性化を完全にブロックし、LTCCが細胞内Ca（2+）の中程度の増加の原因であることを示唆しています。対照的に、OuabainによるNKAの阻害は、NKAの活性化の状態と比較して4.7倍（45）Ca流入を誘導します。さらに、ウアバイン誘発性（45）Caの流入の約70％がKB-R7943によって妨害され、ニフェジピンによって30％のみが妨げられ、LTCCとNCXの両方が細胞内Ca（2+）の上昇に寄与し、それが生じ、それがNCXリバースモードは、NKAの阻害によって誘発される（45）CA流入の主要なソースです。この研究は、NKA誘導Ca（2+）増加の活性化がリバースモードNCXに依存しないことを実証する直接的な証拠を提供し、NKAを介したCa（2+）流入経路の活性化と阻害との機構的区別を特定することを示しています。心筋細胞の方法。

(Na(+)+K(+))-ATPase (NKA) mediates positive inotropy in the heart. Extensive studies have demonstrated that the reverse-mode Na(+)/Ca(2+)-exchanger (NCX) plays a critical role in increasing intracellular Ca(2+) concentration through the inhibition of NKA-induced positive inotropy by cardiac glycosides. Little is known about the nature of the NCX functional mode in the activation of NKA-induced positive inotropy. Here, we examined the effect of an NKA activator SSA412 antibody on (45)Ca influx in isolated rat myocytes and found that KB-R7943, a NCX reverse-mode inhibitor, fails to inhibit the activation of NKA-induced (45)Ca influx, suggesting that the Ca(2+) influx via the reverse-mode NCX does not mediate this process. Nifedipine, an L-type Ca(2+) channel (LTCC) inhibitor, completely blocks the activation of NKA-induced (45)Ca influx, suggesting that the LTCC is responsible for the moderate increase in intracellular Ca(2+). In contrast, the inhibition of NKA by ouabain induces 4.7-fold (45)Ca influx compared with the condition of activation of NKA. Moreover, approximately 70% of ouabain-induced (45)Ca influx was obstructed by KB-R7943 and only 30% was impeded by nifedipine, indicating that both the LTCC and the NCX contribute to the rise in intracellular Ca(2+) and that the NCX reverse-mode is the major source for the (45)Ca influx induced by the inhibition of NKA. This study provides direct evidence to demonstrate that the activation of NKA-induced Ca(2+) increase is independent of the reverse-mode NCX and pinpoints a mechanistic distinction between the activation and inhibition of the NKA-mediated Ca(2+) influx path ways in cardiomyocytes.