抗（4-ヒドロキシ-3-ニトロフェニル）アセチル（NP）抗体の親和性成熟の原因となる記憶B細胞の特性評価

フローサイトメトリーを使用して、NP-Chickenγ-グロブリン（CGG）を免疫したC57BL/6マウスによる、高親和性抗（4-ヒドロキシ-3-ニトロフェニル）アセチル（NP）抗体産生の原因となる記憶B細胞を検索しました。最初に、既知の親和性のB細胞抗原受容体（BCR）を発現するトランスフェクタントを、メモリB細胞モデルとして、およびさまざまなNP価格、NP（LO）、NP（MED）、NP（HI）のNP-アロフィコシアニン（APC）を調製しました（HI）。次に、後者をBCR親和性を区別できるプローブとして使用しました：NP（LO）-APCは、3.4×10（6）m（-1）を超える親和性を持つBCRに結合しますが、NP（MED）-APCは生殖線よりも高い。NP（LO）-APCに結合できるB細胞は、14日目に免疫後14日目に脾臓に現れ、Tyr95（Tyr95タイプ）、およびTrp33からLeuへの突然変異を抱いていました。GLY95（GLY95タイプ）を抱えているBCRSを持つB細胞は、56日目のNP（MED）-APC結合画分と77日目のNP（LO）-APC結合画分にのみ登場し、この長い期間が必要であることを示しています。Gly95タイプBセルは、高い親和性を獲得し、親和性の高いメモリBセルのグループのメンバーになります。77日目にNP-CGGの投与は、次の2週間でNP（LO）-APC結合B細胞のGly95タイプの割合にほとんど変化しませんでしたが、高親和性抗体分泌細胞の数の増加をもたらしました。（ASC）、確立されたメモリB細胞コンパートメントが後の段階で維持され、高親和性ASCSを供給したことを示唆しています。これらのGly95タイプメモリBセルとASCとの関係について説明します。

We searched for memory B cells responsible for high-affinity anti-(4-hydroxy-3-nitrophenyl)acetyl (NP) antibody production by C57BL/6 mice immunized with NP-chicken γ-globulin (CGG), using flow cytometry. We first prepared transfectants expressing B-cell antigen receptor (BCR) of known affinity as a memory B-cell model as well as NP-allophycocyanin (APC) of different NP valences, NP(lo), NP(med) and NP(hi). We then used the latter as probes capable of distinguishing BCR affinities: NP(lo)-APC bound to BCRs with an affinity higher than 3.4 × 10(6) M(-1), while NP(med)-APC bound to those with a higher than germline affinity. B cells capable of binding to NP(lo)-APC appeared in spleens on day 14 post-immunization, and harbored Tyr95 (Tyr95 type) as well as a mutation from Trp33 to Leu. B cells with BCRs harboring Gly95 (Gly95 type) appeared only in the NP(med)-APC-binding fraction on day 56 and in the NP(lo)-APC-binding fraction on day 77, indicating that this long duration was necessary for Gly95 type B cells to acquire high affinity and to become a member of the group of memory B cells with high affinity. Administration of NP-CGG on day 77 caused little change in the proportion of the Gly95 type in NP(lo)-APC-binding B cells in the following 2 weeks but brought about an increase in the number of high-affinity antibody-secreting cells (ASC), suggesting that the memory B-cell compartment established was maintained at a later stage and supplied high-affinity ASCs. The relationship between these Gly95 type memory B cells and ASCs is discussed.