高度に極性有機溶媒でさえもエステル交換反応を触媒するための化学的に修飾されたリパーゼ調製

ピュードモナスセパシアリパーゼとピロメリティックジアンヒドリドのアシル化は、アミノ群全体の72％を修正したことを実施しました。変更されたリパーゼの沈殿のために、異なる有機溶媒をスクリーニングしました。1,2-ジメトキシエタンが97％のタンパク質と完全な活性を沈殿させた最高の沈殿剤であることがわかった。PCMC（タンパク質コーティング微結晶）、CLPCMC（架橋タンパク質コーティングされた微結晶）、EPROS（有機溶媒で沈殿し、有機溶媒ですすいだ）および修飾および未修飾リパーゼのpH調整製剤を調製し、N-Octaneおよびジメチルホルミド（DMFとしてのエステル化反応を実行するために使用されました。N-オクタンでは、すべての調製物の中で、修飾リパーゼのCLPCMCは、未修正のpH調整リパーゼ（128 nmol min（-1）mg（-1））と比較して、最高速度（1970 nmol min（-1）mg（-1））を示しました。DMFでは、1％（v/v）と5％（v/v）の水分含有量の両方で、CLPCMCはそれぞれ0.72および7.2 nmol（-1）mg（-1）の初期速度がそれぞれ高いことを示しました。未修飾pHチューニングリパーゼは、1％と5％（v/v）の水分含有量の両方でDMFでまったく活性を示しませんでした。

Acylation of Pseudomonas cepacia lipase with Pyromellitic dianhydride to modify 72% of total amino groups was carried out. Different organic solvents were screened for precipitation of modified lipase. It was found that 1,2-dimethoxyethane was the best precipitant which precipitated 97% protein and complete activity. PCMC (protein coated microcrystals), CLPCMC (crosslinked protein coated microcrystals), EPROS (enzyme precipitated and rinsed with organic solvents) and pH tuned preparations of modified and unmodified lipase were prepared and used for carrying out transesterification reaction with n-octane and dimethyl formamide (DMF) as reaction medium. In n-octane, among all the preparations, CLPCMC of modified lipase gave highest rate (1970 nmol min(-1)mg(-1)) as compared to unmodified pH tuned lipase (128 nmol min(-1) mg(-1)). In DMF, with both 1% (v/v) and 5% (v/v) water content, CLPCMC showed highest initial rate of 0.72 and 7.2 nmol min(-1) mg(-1), respectively. Unmodified pH tuned lipase showed no activity at all in DMF with both 1% and 5% (v/v) water content.