エキソソームを介したエンドソームおよび分泌におけるCD63とのLMP1関連は、構成的NF-κB活性化を制限します

ユビキタスなエプスタインバーウイルス（EBV）は、人間のB細胞の発達を活用して、世界人口の約90％に持続性感染を確立します。ウイルス性癌遺伝子潜在膜タンパク質1（LMP1）によるNF-κBの構成的活性化は、持続性に重要な役割を果たしますが、EBV関連リンパ腫の危険因子です。ここでは、内因性LMP1が、多核エンドソームの血管内小胞内の蓄積とエキソソームを介した分泌に伴う際に分解を逃れることを実証します。LMP1は、細胞内テトラスパニンCD63をMHC IIを欠いており、「コレステロール閉塞」条件でさえ低コレステロール値を維持する小胞に関連付けて交通しています。脂質ラフトアンカーシーケンスfwly、およびn末端のユビキチン化は、LMP1のソートをエキソソームに制御します。むしろ、ゴルジコンパートメントでLMP1を保持するC末端修飾は、NF-κB過剰刺激につながるCD63濃縮ドメインおよび/またはエキソソーム分泌物内のアセンブリを排除します。shRNAを介した干渉は、LMP1を介したシグナル伝達におけるCD63の拮抗的な役割をさらに証明しました。したがって、LMP1は、エンドソーム - エキゾソーム経路での人身売買を促進することにより、CD63濃縮マイクロドメインを悪用して下流のNF-κB活性化を抑制します。したがって、CD63は、感染した（腫瘍）細胞内および外部（腫瘍）細胞のLMP1機能の重要なメディエーターです。

The ubiquitous Epstein Barr virus (EBV) exploits human B-cell development to establish a persistent infection in ∼90% of the world population. Constitutive activation of NF-κB by the viral oncogene latent membrane protein 1 (LMP1) has an important role in persistence, but is a risk factor for EBV-associated lymphomas. Here, we demonstrate that endogenous LMP1 escapes degradation upon accumulation within intraluminal vesicles of multivesicular endosomes and secretion via exosomes. LMP1 associates and traffics with the intracellular tetraspanin CD63 into vesicles that lack MHC II and sustain low cholesterol levels, even in 'cholesterol-trapping' conditions. The lipid-raft anchoring sequence FWLY, nor ubiquitylation of the N-terminus, controls LMP1 sorting into exosomes. Rather, C-terminal modifications that retain LMP1 in Golgi compartments preclude assembly within CD63-enriched domains and/or exosomal discharge leading to NF-κB overstimulation. Interference through shRNAs further proved the antagonizing role of CD63 in LMP1-mediated signalling. Thus, LMP1 exploits CD63-enriched microdomains to restrain downstream NF-κB activation by promoting trafficking in the endosomal-exosomal pathway. CD63 is thus a critical mediator of LMP1 function in- and outside-infected (tumour) cells.