バクテリオファージBFK20のエンドリシン：触媒および細胞壁結合ドメインの証拠

ORF24 'の遺伝子産物は、Corynephage BFK20のゲノムで推定ファージエンドリシンとして同定されました。エンドリシンBFK20（GP24 '）のタンパク質は、N末端Amidase_2ドメイン（GP24CD）とC末端細胞壁結合ドメイン（GP24BD）で構成されるモジュール構造を持っています。C末端ドメインは、ファージエンドリシンの既知の細胞壁結合ドメインのいずれかとは無関係です。エンドリシン遺伝子全体とそのN末端およびC末端ドメインの配列がクローン化されました。タンパク質は大腸菌で発現し、均一性に精製されました。エンドリシンとその触媒ドメインの溶解活性は、コリネバクテリアとバチルス基質で実証されました。細胞壁結合ドメインの単独および緑色蛍光タンパク質（GP24BD-GFP）との融合中の結合活性は、BFK20宿主Brevibacterium flavum CCM 251および他のcorynebacteriaの細胞表面への特定の結合アッセイによって示されました。

A gene product of ORF24' was identified on the genome of corynephage BFK20 as a putative phage endolysin. The protein of endolysin BFK20 (gp24') has a modular structure consisting of an N-terminal amidase_2 domain (gp24CD) and a C-terminal cell wall binding domain (gp24BD). The C-terminal domain is unrelated to any of the known cell wall binding domains of phage endolysins. The whole endolysin gene and the sequences of its N-terminal and C-terminal domains were cloned; proteins were expressed in Escherichia coli and purified to homogeneity. The lytic activities of endolysin and its catalytic domain were demonstrated on corynebacteria and bacillus substrates. The binding activity of cell wall binding domain alone and in fusion with green fluorescent protein (gp24BD-GFP) were shown by specific binding assays to the cell surface of BFK20 host Brevibacterium flavum CCM 251 as well as those of other corynebacteria.