シナプス小胞の容易に回収可能なプール

クラスリンを介したエンドサイトーシスは、シナプス小胞リサイクルの主要なメカニズムであると考えられていますが、高速リサイクルには遅すぎるようです。したがって、シナプス前膜上のシナプス小胞タンパク質の誤って浸透し、浸透したプールは、速いクラスリン媒介エンドサイトーシスの最初の波を支持する可能性があることが示唆されました。この研究では、新しいタイプのプローブを使用して、ラット海馬ニューロンのシナプス小胞タンパク質のこのような「容易に回復可能なプール」の時間的ダイナミクスを監視しました。シナプス小胞タンパク質の管腔ドメインに対する抗体に結合した新しいシアニン染料ベースのpH感受性外因性マーカーであるCypher5Eを適用することにより、シナプス小胞リサイクルを確実に監視し、エンドクト症プロテンシスが刺激されたシナプス小胞プロテンシスの表面プールの表面プールの優先的な動員を実証することができました。。表面標識シナプトタグミン1の蛍光ナノ鏡検査を使用することにより、エンドサイトーシスの所有部位を表す海馬ボウトンの周産ゾーンで表面プールの空間分布を解決することができました。

Although clathrin-mediated endocytosis is thought to be the predominant mechanism of synaptic vesicle recycling, it seems to be too slow for fast recycling. Therefore, it was suggested that a presorted and preassembled pool of synaptic vesicle proteins on the presynaptic membrane might support a first wave of fast clathrin-mediated endocytosis. In this study we monitored the temporal dynamics of such a 'readily retrievable pool' of synaptic vesicle proteins in rat hippocampal neurons using a new type of probe. By applying cypHer5E, a new cyanine dye-based pH-sensitive exogenous marker, coupled to antibodies to luminal domains of synaptic vesicle proteins, we could reliably monitor synaptic vesicle recycling and demonstrate the preferential recruitment of a surface pool of synaptic vesicle proteins upon stimulated endocytosis. By using fluorescence nanoscopy of surface-labeled synaptotagmin 1, we could resolve the spatial distribution of the surface pool at the periactive zone in hippocampal boutons, which represent putative sites of endocytosis.