マウス肝移植片対宿主疾患における非併用破壊性胆管炎の免疫病原性における胆管上皮細胞の役割

非剥離破壊的胆管炎（NSDC）は、小〜中口孔胆管の胆道上皮のT細胞浸潤によって特徴付けられ、胆道上皮細胞（BEC）および最終的にはダクトペニアのアポトーシスを引き起こします。NSDCは、原発性胆道肝硬変（PBC）として知られる自己免疫疾患および同種移植片対宿主疾患（GVHD）および肝臓同種移植片拒絶の主要な組織病理学的プロセスです。B10.D2→BALB/CマウスモデルのNSDCの開始は、肝臓GVHDの肝産生、リポ多糖（LPS）の蓄積、およびケモカイン遺伝子の発現の肝産生、およびその前に先行します。NSDCの小型および中心の肝内胆管への好奇心の制限を説明するために、これらの胆管に覆われているBecは、化学誘導体とサイトカインを分泌し、化学誘引、活性化、およびNSDCを媒介するエフェクターT細胞を分極すると仮定しました。この仮説をテストするために、LPSの有無にかかわらず炎症誘発性マウス組換えサイトカインを使用してin vitroでBALB/Cの不死化BEC（IBEC）を刺激し、ポリメラーゼ鎖反応（PCR）、定量的タンパク質酵素を使用したIBECによるケモカインとサイトカインの発現を決定しました。リンクされた免疫吸着アッセイ（ELISA）、およびマイクロアレイ。刺激されたIBECの化学誘導性活性化T細胞の能力は、特定のケモカイン受容体の阻害剤の存在下と非存在下で評価されました。炎症誘発性サイトカイン、特にIFNγとTNFαの組み合わせにより、ケモカイン受容体CCR1、CCR3、CCR5、およびCXCR3のケモカインリガンドの分泌が誘導されることがわかりました。IBECによって分泌されたケモカインは、IFNγとTNFα化学誘引性T細胞を刺激しました。CCR1、CCR3、CCR5、またはCXCR3の阻害は、活性化T細胞の化学誘導を有意に減少させました。BECは、BECおよび乳管のアポトーシスの原因となるエフェクターT細胞の化学誘導および末端活性化を媒介することにより、おそらくNSDCの免疫病原形成に積極的な役割を果たすと結論付けています。小型および中口径の胆管に並ぶBECによる選択的ケモカイン発現は、この口径のダクトに対するNSDCの制限を説明できます。CCR1、CCR3、CCR5、およびCXCR3の阻害は、類似反応性T細胞の化学誘導および末端活性化をブロックすることを、造血幹細胞移植または矯正肝移植後のNSDCを予防するための潜在的な治療戦略を表しています。

Non-suppurative destructive cholangitis (NSDC) is characterized by T-cell infiltration of the biliary epithelia of small-to medium-caliber bile ducts, causing apoptosis of biliary epithelial cells (BEC) and, ultimately, ductopenia. NSDC is the primary histopathologic process in the autoimmune disease known as primary biliary cirrhosis (PBC) and in alloimmune graft-versus-host disease (GVHD) and hepatic allograft rejection. The onset of NSDC in the B10.D2→BALB/c murine model of hepatic GVHD is preceded by hepatic production of pro-inflammatory cytokines, accumulation of lipopolysaccharide (LPS), and expression of chemokine genes. To explain the curious restriction of NSDC to small- and medium-caliber intrahepatic bile ducts, we hypothesized that BEC lining these bile ducts secrete chemokines and cytokines that chemoattract, activate, and polarize the effector T cells mediating NSDC. To test this hypothesis we stimulated BALB/c immortalized BEC (IBEC) in vitro with pro-inflammatory mouse recombinant cytokines with and without LPS and determined the expression of chemokines and cytokines by IBEC using a polymerase chain reaction (PCR), quantitative protein enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs), and microarrays. The capacity of stimulated IBEC to chemoattract activated T cells was assessed in the presence and absence of inhibitors of specific chemokine receptors. We found that pro-inflammatory cytokines, especially the combination of IFNγ and TNFα, induced IBEC gene expression and the secretion of chemokine ligands for the chemokine receptors CCR1, CCR3, CCR5, and CXCR3. Chemokines secreted by IBEC stimulated with IFNγ plus TNFα chemoattracted activated T cells. Inhibition of CCR1, CCR3, CCR5, or CXCR3 significantly reduced the chemoattraction of activated T cells. We conclude that BEC probably play an active role in the immunopathogenesis of NSDC by mediating the chemoattraction and terminal activation of effector T cells responsible for apoptosis of BECs and ductopenia. Selective chemokine expression by BEC lining small- and medium-caliber bile ducts could explain the restriction of NSDC to ducts of this caliber. Inhibition of CCR1, CCR3, CCR5, and CXCR3 to block the chemoattraction and terminal activation of alloreactive T cells represents a potential therapeutic strategy for preventing NSDC after hematopoietic stem-cell transplantation or orthotopic liver transplantation.