心筋細胞におけるC型ナトリウム利尿ペプチドとその受容体NPR-Bの発現

C型ナトリウム利尿ペプチド（CNP）は最近、mRNAおよびタンパク質レベルで心筋で発見されましたが、心筋細胞がCNPを生成できるかどうかは不明です。この研究の目的は、in vitroおよびex in vivoの両方で、心臓細胞におけるCNPとその特異的受容体NPR-Bの発現を決定することでした。CNP、脳ナトリウム利尿ペプチド（BNP）およびナトリウム利尿ペプチド受容体（NPR）-B mRNA発現は、新生児ラットの原発性心筋細胞およびヒトウクビタール静脈内皮細胞（Huvecs）のH9C2ラット心筋筋芽細胞株のRT-PCRによって検査されました。コントロール。CNPタンパク質の発現は、免疫組織化学によって成人の雄のミニピグから得られた心臓組織切片と、免疫細胞化学と特定の無線免疫測定法の両方によってH9C2細胞で得られました。結果は、心臓細胞と内皮細胞がCNPを産生できることを示しました。予想どおり、心筋細胞とは異なり、内皮細胞ではBNPの発現は検出されませんでした。NPR-B mRNA発現は、両方の細胞型で見つかりました。タンパク質レベルでの心筋細胞におけるCNPの産生は、放射免疫学的測定（H9C2：CNP = 0.86±0.083 pg/mg）および免疫細胞化学研究によって確認されました。組織切片の免疫染色により、CNPは内皮と心筋細胞の両方で検出されました。遺伝子およびタンパク質レベルでの心臓細胞におけるCNPの発現は、心臓がCNPの産生に積極的に関与していることを示唆しています。

C-type natriuretic peptide (CNP) was recently found in myocardium at the mRNA and protein levels, but it is not known whether cardiomyocytes are able to produce CNP. The aim of this study was to determine the expression of CNP and its specific receptor NPR-B in cardiac cells, both in vitro and ex vivo. CNP, brain natriuretic peptide (BNP) and natriuretic peptide receptor (NPR)-B mRNA expression were examined by RT-PCR in the H9c2 rat cardiac myoblast cell line, in neonatal rat primary cardiomyocytes and in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) as control. CNP protein expression was probed in cardiac tissue sections obtained from adult male minipigs by immunohistochemistry, and in H9c2 cells both by immunocytochemistry and by specific radioimmunoassay. The results showed that cardiac cells as well as endothelial cells were able to produce CNP. Unlike cardiomyocytes, as expected, in endothelial cells expression of BNP was not detected. NPR-B mRNA expression was found in both cell types. Production of CNP in the heart muscle cells at protein level was confirmed by radioimmunological determination (H9c2: CNP=0.86 ± 0.083 pg/mg) and by immunocytochemistry studies. By immunostaining of tissue sections, CNP was detected in both endothelium and cardiomyocytes. Expression of CNP in cardiac cells at gene and protein levels suggests that the heart is actively involved in the production of CNP.