スリット：正中線のグリアと委員会の軸索経路の開発に必要な細胞外タンパク質には、EGFとLRRドメインの両方が含まれています

ショウジョウバエのスリット軌跡は、保存された隣接シーケンス（これらの配列を囲むフランクLRR-Flank）を備えた24アミノ酸ロイシンリッチリピート（LRR）のタンデムアレイを含む4つの領域を持つタンパク質をコードし、その後、表皮成長因子（EGF） - likeの繰り返しを持つ2つの領域が続きます。これらの各モチーフは、他のさまざまなタンパク質の細胞外ドメインの一部としてタンパク質間相互作用に関係しています。スリットcDNAクローンの分析により、代替スプライシングの結果として、遺伝子座は、最後のEGF繰り返しのカルボキシル末端で11アミノ酸によって異なる2つの異なるタンパク質種をコーディングできることが明らかになりました。推定シグナル配列の存在と膜貫通ドメインの存在は、スリットが分泌されることを示唆しています。これは、組織培養におけるその発現の分析によって支持された観察です。抗体染色、エンハンサートラップ検出、およびその場のハイブリダイゼーションによる胚のスリットの発現パターンを調べると、タンパク質が発達中の中枢神経系の正中線に沿ったグリア細胞のサブセットによって発現されることを示します。免疫電子顕微鏡を介して、これらのニューロンの細胞体には存在しないものの、グリア細胞を横切る交配軸索でスリットを見ることができます。最後に、スリット発現の減少により、発達中の正中細胞と交連れの軸索経路が破壊されることを実証します。受容体結合EGF様リガンドと接着性糖タンパク質の両方に対する胚の局在、変異表現型、およびスリットの相同性は、正中線のグリア細胞、それらの細胞外環境、および正中線を通過するcommissural軸との相互作用に関与している可能性があることを示唆しています。

The Drosophila slit locus encodes a protein with four regions containing tandem arrays of a 24-amino-acid leucine-rich repeat (LRR) with conserved flanking sequences (flank-LRR-flank surrounding these arrays), followed by two regions with epidermal growth factor (EGF)-like repeats. Each of these motifs has been implicated in protein-protein interactions as part of an extracellular domain in a variety of other proteins. Analysis of slit cDNA clones reveals that as a consequence of alternative splicing, the locus can code for two distinct protein species differing by 11 amino acids at the carboxyl terminus of the last EGF repeat. The existence of a putative signal sequence and the absence of a transmembrane domain suggest that slit is secreted, an observation supported by an analysis of its expression in tissue culture. Examining the expression pattern of slit in the embryo by antibody staining, enhancer trap detection, and in situ hybridization, we demonstrate that the protein is expressed by a subset of glial cells along the midline of the developing central nervous system. Through immunoelectron microscopy, slit can be seen on the commissural axons traversing the glial cells although it is absent from the cell bodies of these neurons, implying that slit is exported by the glia and distributed along the axons. Finally, we demonstrate that a reduction in slit expression results in a disruption of the developing midline cells and the commissural axon pathways. The embryonic localization, mutant phenotype, and homology of slit to both receptor-binding EGF-like ligands and adhesive glycoproteins suggest that it may be involved in interactions between the midline glial cells, their extracellular environment, and the commissural axons that cross the midline.