カポシの肉腫関連ヘルペスウイルスによるリンパ芽球細胞株の感染：細胞関連ウイルスの重要な役割

カポシの肉腫関連ヘルペスウイルス（KSHV）はin vivoで強力なリンパ誘発性を示しますが、逆説的に、確立されたB細胞株は、可溶性KSHVビリオンによる感染に大部分が耐抵抗性があります。ここでは、このブロックが細胞関連ウイルスにさらされることで克服できることを示します。ドキシサイクリン誘導性組換えKSHV.219（RKSHV.219） - 採掘SLK（ISLK.219）細胞がKSHVドナーとして使用されました。再活性化されたISLK.219細胞とのリンパ細胞株の共栽培は、各細胞株への容易に実証可能なウイルス侵入をもたらしました。同様の観察結果は、一次扁桃b細胞培養で行われました。さらに、感染したリンパ細胞は、プロマイシンの選択により成長することができ、持続性感染の発生を示しています。感染したBJAB細胞は、古典的な潜時関連転写産物、ラナ発現の点状パターン、KSHVゲノムのエピソム維持など、潜在的な感染の署名を示します。しかし、さまざまな化学刺激によってlytivially活性化されると、感染したBJAB細胞は低レベルの感染性ビリオンのみを生成することができました。これらのデータは、（I）細胞関連ウイルスがほとんどのリンパ細胞株でウイルス侵入ブロックをバイパスできることを示しています。エンターリーは、効率的な溶解再活性化にブロックします。

Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) displays strong lymphotropism in vivo, but paradoxically, established B cell lines have largely been refractory to infection by soluble KSHV virions. Here we show that this block can be overcome by exposure to cell-associated virus. Doxycycline-inducible recombinant KSHV.219 (rKSHV.219)-harboring SLK (iSLK.219) cells were employed as KSHV donors. Cocultivation of lymphoid cell lines with reactivated iSLK.219 cells resulted in readily demonstrable viral entry into each cell line; similar observations were made in primary tonsillar B cell cultures. Moreover, infected lymphoid cells were able to outgrow upon puromycin selection, indicating development of persistent infection. Infected BJAB cells display signatures of latent infection, including classical latency-associated transcripts, a punctate pattern of LANA expression, and episomal maintenance of the KSHV genome. However, when lytically activated by various chemical stimuli, infected BJAB cells were able to produce only low levels of infectious virions. These data demonstrate that (i) cell-associated viruses can bypass viral entry blocks in most lymphoid cell lines, (ii) the determinants of cell-associated virus entry differ from those of soluble virion infection, and (iii) immortalized lymphoblastoid lines have partial postentry blocks to efficient lytic reactivation.