抗体産生CHO細胞の栽培に関するヒポキサンチンとチミジンの役割[修正]の洞察：細胞の成長、抗体産生、長期安定性

この研究では、CHO細胞の成長とモノクローナル抗体（MAB）の産生を促進するヒポキサンチンとチミジン（H＆T）の可能性を調査しました。H＆Tは、主に統合された生存細胞濃度（IVCC）の上昇により、初期細胞の成長を刺激し、抗ヒトCD20 mAbの体積生成を22％刺激したことが実証されました。細胞周期分布の中程度の変化は、細胞の成長の増加を部分的に説明する可能性があります。その後の長期安定性研究は、H＆TがMAB生産性における減衰動態を加速しないことを示しました。具体的には、核酸=レプレット（H＆T補給）と核酸に飢えている（メトトレキサート治療）培養状態の両方の細胞が、最初の2か月間に同様の安定したMAB産生を示し、その後、特定の生産率（Q（MAB）（Q（MAB））が徐々に減少しました。）4か月目に40％減少しました。さらに、抗ヒトCD20 MABの細胞内重鎖（HC）の転写産物レベルの低下は、Qの減少とよく相関していました。さらに、ヒポキサンチン - グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（HPRT）遺伝子の機能喪失発生に関するゲノム変異率が決定され、H＆Tがメトトレキシート（MTX）が変異率を引き起こしている間、HPRTの自然変異率を抑制したことを示しています。まとめて、我々のデータは、潜在的な媒体添加剤としてのH＆Tが、MABの初期細胞の成長と体積生成の両方を促進し、抗体生産CHO細胞の長期的な安定性に影響を与えないことを示しています。

The potential of hypoxanthine and thymidine (H&T) to promote growth of CHO cells and production of monoclonal antibody (mAb) was explored in this study. It was demonstrated that H&T stimulated the initial cell growth and enhanced volumetric production of anti-human CD20 mAb by 22%, mainly through the elevated integrated viable cell concentration (IVCC). The moderate alteration in cell cycle distribution might partially account for the increased cell growth. Subsequent long-term stability studies indicated that H&T did not accelerate decay kinetics in mAb productivity. Specifically, cells under both nucleic acids-replete (H&T supplementation) and nucleic acids-hungry (methotrexate treatment) culture conditions showed similar stable mAb production during the first 2 months, followed by a gradual decline in the specific production rate (q(mAb)) with a 40% drop at the fourth month. In addition, the decreased transcript level of intracellular heavy chain (HC) of anti-human CD20 mAb correlated well with the decreased q(mAb). Furthermore, genomic mutation rate regarding the loss-of-function occurrence of the hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HPRT) gene was determined, showing that H&T repressed the HPRT spontaneous mutation rate while methotrexate (MTX) provoked the mutation rate. Collectively, our data illustrated that H&T as potential medium additives promoted both initial cell growth and volumetric production of mAb, while not affecting the long-term stability of antibody-producing CHO cells.