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Phytochemical analysis : PCA20120101Vol.23issue(2)

Uncaria tomentosaにおけるオキシインドールアルカロイドのHPLC分析:要因設計によるサンプルの準備と分析の最適化

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

はじめに:Uncaria Tomentosa(「猫の爪」)は、いくつかの感染性および炎症性疾患の治療に広く使用されています。オキシインドールアルカロイドは、植物に起因する生物活性の最も重要な成分と見なされています。彼らの分析では、効率的なサンプル準備と適切な参照基準が必要ですが、市販の人はほとんどいません。 目的:サンプル調製に重点を置いて、Uncaria tomentosaのOxindoleアルカロイドのHPLC分析方法を開発および検証する。 方法:サンプル調製とクロマトグラフィー分離の両方を最適化するために、要因実験設計が使用されました。最適化されたサンプル調製には、エタノール水性による抽出が含まれ、粉末植物材料の顆粒測定は抽出収率に大きく影響しました。ミトラフィリンは、総アルカロイドの測定のためのキャリブレーション参照として使用されました。 結果:この方法は完全に検証され、良好な選択性、直線性(R²≥0.9996)、精度(≥96%)および精度(RSD <2.4%)を示しました。ミトラフィリンの検出および定量化制限は、それぞれ0.8および2.4 ppmでした。 結論:移動相で有機緩衝液を使用した最適化されたクロマトグラフィー法は、サンプル中のテトラサイクリックおよび五角アルカロイドのベースライン分離を提供しました。ミトラフィリンを使用したキャリブレーションは、他の利用可能な参照アルカロイドと比較した場合、総アルカロイド含有量のより正確な推定値を提供しました。

はじめに:Uncaria Tomentosa(「猫の爪」)は、いくつかの感染性および炎症性疾患の治療に広く使用されています。オキシインドールアルカロイドは、植物に起因する生物活性の最も重要な成分と見なされています。彼らの分析では、効率的なサンプル準備と適切な参照基準が必要ですが、市販の人はほとんどいません。 目的:サンプル調製に重点を置いて、Uncaria tomentosaのOxindoleアルカロイドのHPLC分析方法を開発および検証する。 方法:サンプル調製とクロマトグラフィー分離の両方を最適化するために、要因実験設計が使用されました。最適化されたサンプル調製には、エタノール水性による抽出が含まれ、粉末植物材料の顆粒測定は抽出収率に大きく影響しました。ミトラフィリンは、総アルカロイドの測定のためのキャリブレーション参照として使用されました。 結果:この方法は完全に検証され、良好な選択性、直線性(R²≥0.9996)、精度(≥96%)および精度(RSD <2.4%)を示しました。ミトラフィリンの検出および定量化制限は、それぞれ0.8および2.4 ppmでした。 結論:移動相で有機緩衝液を使用した最適化されたクロマトグラフィー法は、サンプル中のテトラサイクリックおよび五角アルカロイドのベースライン分離を提供しました。ミトラフィリンを使用したキャリブレーションは、他の利用可能な参照アルカロイドと比較した場合、総アルカロイド含有量のより正確な推定値を提供しました。

INTRODUCTION: Uncaria tomentosa ("cat's claw") is widely used for the treatment of some infectious and inflammatory diseases. Oxindole alkaloids are regarded as the most important components responsible for the biological activities attributed to the plant. Their analysis require efficient sample preparation and suitable reference standards but few are commercially available. OBJECTIVE: To develop and validate a HPLC analytical method for oxindole alkaloids in Uncaria tomentosa with emphasis on sample preparation. METHOD: Factorial experimental designs were used for the optimisation of both sample preparation and chromatographic separation. The optimised sample preparation involved extraction with aqueous ethanol, and the granulometry of the powdered plant material significantly influenced extraction yields. Mitraphylline was used as a calibration reference for the determination of total alkaloids. RESULTS: The method was fully validated and showed good selectivity, linearity (r²  ≥ 0.9996), accuracy (≥ 96%) and precision (RSD < 2.4%). Detection and quantification limits for mitraphylline were 0.8 and 2.4 ppm, respectively. CONCLUSION: The optimised chromatographic method, using organic buffer in the mobile phase, provided baseline separation of tetracyclic and pentacyclic alkaloids in the samples. Calibration using mitraphylline provided more accurate estimates of total alkaloid content when compared to other available reference alkaloids.

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