ケモカインCCL2（MCP-1）の薬理学的阻害は、慢性肝障害における肝臓マクロファージ浸潤と脂肪性肝炎を減少させます

目的：ケモカイン受容体C-Cケモカイン受容体2（CCR2）の主要なリガンドであるモノサイトケモタクタントタンパク質-1（MCP-1、CCL2）は、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）患者の肝臓で増加し、脂肪肝炎および線維腫炎および線維症のマウスモデルのマウスモデルが増加します。。最近、損傷時の肝臓への単球/マクロファージ浸潤は、CCL2/CCR2軸によって非常に調節され、肝炎症と線維形成を永続させるために機能的に重要であることが示されました。構造化されたL-エナンチオマーRNAオリゴヌクレオチドMNOX-E36（いわゆるスピーゲルマー）は、マウスMCP-1を強力に結合および阻害します。MCP-1のMNOX-E36の薬理学的阻害は、慢性肝疾患の2つのマウスモデルで調査されました。 方法：3回の週のMNOX-E36によるMCP-1の薬理学的阻害は、急性または慢性四塩化炭素（CCL（4）） - およびメチオニンコリン欠損（MCD）食事誘発性慢性肝障害のマウスモデルでテストされました。vivo。 結果：MNOX-E36によるMCP-1に拮抗することは、in vitroでマウス単球の走化性を効率的に阻害し、in vivoでの急性毒性損傷の際に肝臓へのGR1（+）（LY6C（+））血液単球の移動。CCL（4）およびMCD食事誘発性肝障害のマウスモデルでは、蛍光活性化細胞ソート（FACS）分析と免疫組織化学化学によって見られるように、抗MCP-1処理マウスで肝臓へのマクロファージの浸潤が有意に減少しました。。肝内マクロファージのレベルが低いことに沿って、炎症誘発性サイトカイン（腫瘍壊死因子α、インターフェロンγおよびインターロイキン6）は、肝臓組織で有意に減少しました。6（CCL（4））または8週間（MCDダイエット）にわたる全体的な線維症の進行は、抗MCP-1治療によって有意に変化しませんでした。しかし、MCDダイエットチャレンジの際に、MNOX-E36治療動物では、より低いレベルの脂肪肝臓変性（組織学スコア、オイルレッドO染色、肝トリグリセリド含有量、脂質生成遺伝子）が検出されました。MNOX-E36は、治療投与時の肝脂肪症を改善しました。 結論：これらの結果は、2つのin vivoモデルでの慢性肝障害中にMCP-1をブロックすることにより、肝臓単球/マクロファージ浸潤の薬理学的阻害の成功を示しています。関連する改善された脂肪症の発達は、MCP-1の阻害が肝臓炎症および脂肪性肝炎における薬理学的治療の興味深い新規アプローチであることを示唆しています。

OBJECTIVE: Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1, CCL2), the primary ligand for chemokine receptor C-C chemokine receptor 2 (CCR2), is increased in livers of patients with non-alcoholic steatohepatitis (NASH) and murine models of steatohepatitis and fibrosis. It was recently shown that monocyte/macrophage infiltration into the liver upon injury is critically regulated by the CCL2/CCR2 axis and is functionally important for perpetuating hepatic inflammation and fibrogenesis. The structured L-enantiomeric RNA oligonucleotide mNOX-E36 (a so-called Spiegelmer) potently binds and inhibits murine MCP-1. Pharmacological inhibition of MCP-1 with mNOX-E36 was investigated in two murine models of chronic liver diseases. METHODS: Pharmacological inhibition of MCP-1 by thrice-weekly mNOX-E36 subcutaneously was tested in murine models of acute or chronic carbon tetrachloride (CCl(4))- and methionine-choline-deficient (MCD) diet-induced chronic hepatic injury in vivo. RESULTS: Antagonising MCP-1 by mNOX-E36 efficiently inhibited murine monocyte chemotaxis in vitro as well as migration of Gr1(+) (Ly6C(+)) blood monocytes into the liver upon acute toxic injury in vivo. In murine models of CCl(4)- and MCD diet-induced hepatic injury, the infiltration of macrophages into the liver was significantly decreased in anti-MCP-1-treated mice as found by fluorescence-activated cell sorting (FACS) analysis and immunohistochemistry. In line with lower levels of intrahepatic macrophages, proinflammatory cytokines (tumour necrosis factor α, interferon γ and interleukin 6) were significantly reduced in liver tissue. Overall fibrosis progression over 6 (CCl(4)) or 8 weeks (MCD diet) was not significantly altered by anti-MCP-1 treatment. However, upon MCD diet challenge a lower level of fatty liver degeneration (histology score, Oil red O staining, hepatic triglyceride content, lipogenesis genes) was detected in mNOX-E36-treated animals. mNOX-E36 also ameliorated hepatic steatosis upon therapeutic administration. CONCLUSIONS: These results demonstrate the successful pharmacological inhibition of hepatic monocyte/macrophage infiltration by blocking MCP-1 during chronic liver damage in two in vivo models. The associated ameliorated steatosis development suggests that inhibition of MCP-1 is an interesting novel approach for pharmacological treatment in liver inflammation and steatohepatitis.