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ショウジョウバエのメラノガスターのクロックニューロンのさまざまなサブセットは、毎日の運動リズムにおける特定の機能と、神経伝達物質組成の違いによって特徴付けられます。成体ハエのリズミカルな運動挙動における神経ペプチドF(NPF)免疫反応性時計ニューロンの機能を調査しました。前述の3つのLN(d)Sに加えて、5番目のS-LN(V)とL-LN(V)SのサブセットをNPF陽性として新たに特定しました。次に、CRYGAL80およびPDFGAL80と組み合わせて、細胞死遺伝子ヘッドの退縮欠陥(HID)のNPFGAL4ターゲティング発現を使用して、NPF発現ニューロンの異なるサブセットを選択的に除去しました。これらのハエの毎日の運動リズムを分析することにより、NPF陽性クロックニューロン、特に5番目のS-LN(V)とLN(D)S-が、自由回実行期間の制御の両方に関与していることを示します。一定の暗闇(DD)と、ライトダーク(LD)サイクルの夕方の活動のフェージングと振幅。さらに、NPFと色素分散因子(PDF)免疫反応性ニューロンの同時アブレーションがLDに加法効果があることを示しており、PDF精製されたハエと比較してさらに進んだ夕方のピーク相をもたらします。また、このより高度な夕方のピークの振幅はさらに減少することがわかりました。観測された表現型をNPFの作用に推定的に割り当てるために、RNAインターフェンス(RNAI)を使用してPDFと組み合わせてノックダウンし、ハエの夜の活動の制御におけるNPFの可能性のある役割をさらに示唆しました。
ショウジョウバエのメラノガスターのクロックニューロンのさまざまなサブセットは、毎日の運動リズムにおける特定の機能と、神経伝達物質組成の違いによって特徴付けられます。成体ハエのリズミカルな運動挙動における神経ペプチドF(NPF)免疫反応性時計ニューロンの機能を調査しました。前述の3つのLN(d)Sに加えて、5番目のS-LN(V)とL-LN(V)SのサブセットをNPF陽性として新たに特定しました。次に、CRYGAL80およびPDFGAL80と組み合わせて、細胞死遺伝子ヘッドの退縮欠陥(HID)のNPFGAL4ターゲティング発現を使用して、NPF発現ニューロンの異なるサブセットを選択的に除去しました。これらのハエの毎日の運動リズムを分析することにより、NPF陽性クロックニューロン、特に5番目のS-LN(V)とLN(D)S-が、自由回実行期間の制御の両方に関与していることを示します。一定の暗闇(DD)と、ライトダーク(LD)サイクルの夕方の活動のフェージングと振幅。さらに、NPFと色素分散因子(PDF)免疫反応性ニューロンの同時アブレーションがLDに加法効果があることを示しており、PDF精製されたハエと比較してさらに進んだ夕方のピーク相をもたらします。また、このより高度な夕方のピークの振幅はさらに減少することがわかりました。観測された表現型をNPFの作用に推定的に割り当てるために、RNAインターフェンス(RNAI)を使用してPDFと組み合わせてノックダウンし、ハエの夜の活動の制御におけるNPFの可能性のある役割をさらに示唆しました。
Different subsets of Drosophila melanogaster's clock neurons are characterized by their specific functions in daily locomotor rhythms and the differences in their neurotransmitter composition. We investigated the function of the neuropeptide F (NPF) immunoreactive clock neurons in the rhythmic locomotor behavior of adult flies. We newly identified the fifth s-LN(v) and a subset of the l-LN(v)s as NPF-positive in addition to the three LN(d)s that have been described previously. We then selectively ablated different subsets of NPF-expressing neurons using npfGal4-targeted expression of the cell death gene head involution defective (hid) in combination with cryGal80 and pdfGal80. By analyzing daily locomotor rhythms in these flies, we show that the NPF-positive clock neurons--especially the fifth s-LN(v) and the LN(d)s--are involved in both the control of the free-running period in constant darkness (DD) and the phasing and amplitude of the evening activity in light-dark (LD) cycles. Furthermore, we show that the simultaneous ablation of NPF and pigment dispersing factor (PDF)-immunoreactive neurons has additive effects in LD, resulting in an evening peak phase that is even more advanced in comparison to PDF-ablated flies. We also found that this more advanced evening peak is additionally reduced in amplitude. To putatively assign the observed phenotypes to the action of NPF, we knocked it down in conjunction with PDF using RNA-interference (RNAi) and further suggest a possible role for NPF in the control of the flies' evening activity.
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