ラット肝臓におけるCC531ラット結腸直腸癌細胞の転移成長に対するオステオポンチン発現の影響

肝転移の発生は、結腸直腸癌関連の死亡のほとんどの原因です。オステオポンチン（OPN）は小さなインテグリン結合N結合糖タンパク質であり、肝転移の形成に重要な役割を果たします。この研究は、in vivoで肝臓転移を減少させるために、アンチセンス - オリゴヌクレオチド（ASO（OPN））によるOPN発現を抑制することを目的としています。ASO（OPN）の効果は、MRNAおよびタンパク質の発現レベルを決定することにより、感覚（SO）またはナンセンス（NSO）オリゴマーと比較して、CC531（LACZ）結腸直腸癌細胞のin vitroで調査されました。in vivo処理のために、CC531（LACZ）細胞をラットに嚢胞内に接種して、浸透圧ミニポンプによる長期の皮下投与に続いて、ASOとNSOオリゴマーの効果を比較しました。得られた肝臓のCC531（LACZ）腫瘍細胞負荷は、β-ガラクトシダーゼアッセイによって測定されました。in vitroでのCC531（LACZ）細胞の増殖は、ASO（OPN）およびSO治療（P <0.001）の後に有意に減少しました。ASO（OPN）が投与されている限り、肝転移の発生は減少しましたが、ASO（OPN）投与の終了後、この効果は急速に鈍化しました。対照的に、SOの投与は腫瘍負荷減少をもたらし、驚くほど長期にわたる転移抑制の観点からin vivoでのASO（OPN）効果を上回り、動物の生存率の増加を伴いました。ラットでのASO（OPN）の投与は、肝臓の転移を減らすのに効果的でした。短命の効果は、ASOSの半減期を増やすのに適した修正によって拡張される可能性があります。さらに、SOによって引き起こされる優れた抗転移効果がありましたが、これは以前に報告されていません。

Development of hepatic metastasis is responsible for most of colorectal cancer-related deaths. Osteopontin (OPN) is a small integrin-binding N-linked glycoprotein, which plays a crucial role in the formation of hepatic metastasis. This study aimed to suppress Opn expression by an antisense-oligonucleotide (ASO(Opn)) to decrease liver metastasis in vivo. The effect of ASO(Opn) was investigated in vitro in CC531(lacZ) colorectal cancer cells in comparison to sense (SO) or nonsense (NSO) oligomers, by determining mRNA and protein expression levels, as well as cell survival. For in vivo treatment, CC531(lacZ) cells were intraportally inoculated into rats to compare the effects of ASO, SO and NSO oligomers, following prolonged subcutaneous administration by osmotic mini-pumps. The resulting CC531(lacZ) tumor cell load in the liver was measured by a β-galactosidase assay. Proliferation of CC531(lacZ) cells in vitro was significantly decreased after ASO(Opn) and SO treatment (P<0.001). Liver metastasis development was reduced as long as ASO(Opn) was administered, but this effect was rapidly blunted following the end of the ASO(Opn) administration. In contrast, administration of the SO resulted in a tumor load reduction, which surprisingly surpassed the ASO(Opn) effect in vivo in terms of a long-lasting metastasis suppression, which was accompanied with increased survival of the animals. Administration of the ASO(Opn) in rats was effective in decreasing their liver metastasis. The short-lived effect might be extended by modifications suited to increase the ASOs' half-life. In addition, there was a superior anti-metastatic effect caused by the SO, which has not been reported previously.