キュライン、ビスベンジルイソキノリンアルカロイドは、A7R5細胞のL型CA²⁺チャネルをブロックし、細胞内Ca²⁺トランジェントを減少させます

キュリンは、以前は血管拡張薬として報告されていた新しいビスベンジリソキノリンアルカロイドです。キュラインの血管拡張因子効果の基礎となるメカニズムはまだ特徴付けられていません。この研究では、ラット大動脈におけるキュラインの血管拡張効果の原因となる細胞メカニズムを調査しました。キュラインの血管軸活性は、ミオグラフを使用して記録されました。A7R5細胞のCa（2+）電流は、全細胞パッチクランプ技術を使用して測定されました。細胞内Ca（2+）トランジェントは、共焦点顕微鏡を使用して決定されました。濃度依存的に、キュラインは、ラット大動脈における高細胞K（+）およびBAY K8644によって誘発される収縮を阻害し、細胞外Kの増加に応じて膜脱分極によって誘導される細胞内Ca（2+）濃度の上昇を減少させました（+）血管平滑筋細胞の濃度。さらに、キュラインは、電流密度対電圧関係の特性と定常状態の活性化を変えることなく、濃度依存的にL型Ca（2+）電流（I（CA、L））のピーク振幅を減少させました。I（ca、l）。さらに、キュラインは、I（Ca、L）の定常状態の不活性化曲線を、より過分極膜電位に向けてシフトしました。次のいずれも、i（ca、l）振幅に対するキュラインの効果を修正しませんでした：ホスホジエステラーゼの阻害剤である3-イソブチル-1-メチルキサンチン。プロテインキナーゼA（PKA）の活性化因子であるジブリル環状アンプ。または、プロテインキナーゼG（PKG）の活性化因子である8-BR-Cyclic GMP。我々の結果は、キュラインがラット大動脈平滑筋細胞のL型電圧依存性Ca（2+）電流を阻害し、それが血管弛緩につながった細胞内グローバルCa（2+）トランジェントの減少を引き起こしたことを示した。

Curine is a novel bisbenzylisoquinoline alkaloid that has previously been reported as a vasodilator. The underlying mechanism(s) of the vasodilator effect of curine remains to be characterized. In this study, we investigated the cellular mechanism that is responsible for the vasodilator effect of curine in the rat aorta. The vasorelaxant activity of curine was recorded using a myograph. Ca(2+) currents in A7r5 cells were measured using the whole-cell patch-clamp technique. Intracellular Ca(2+) transients were determined using confocal microscopy. In a concentration-dependent manner, curine inhibited contractions elicited by high extracellular K(+) and Bay K8644 in the rat aorta and reduced the rise in the intracellular Ca(2+) concentration induced by membrane depolarization in response to an increase in extracellular K(+) concentration in vascular smooth muscle cells. Moreover, curine decreased the peak amplitude of L-type Ca(2+) currents (I(Ca,L)) in a concentration-dependent manner without changing the characteristics of the current density vs. voltage relationship and the steady-state activation of I(Ca,L). Furthermore, curine shifted the steady-state inactivation curve of I(Ca,L) toward more hyperpolarized membrane potentials. None of the following modified the effect of curine on I(Ca,L) amplitude: 3-isobutyl-1-methylxanthine, an inhibitor of phosphodiesterases; dibutyryl cyclic AMP, an activator of protein kinase A (PKA); or 8-Br-cyclic GMP, an activator of protein kinase G (PKG). Our results showed that curine inhibited the L-type voltage-dependent Ca(2+) current in rat aorta smooth muscle cells, which caused a decrease in intracellular global Ca(2+) transients that led to vasorelaxation.