ヒト血小板溶解物で拡張された間葉系幹細胞は、T-およびNK細胞の増殖と機能の阻害能力の低下を示します

間葉系間質細胞（MSC）の培養と拡大に胎児のウシ血清（FBS）を使用すると、臨床応用の可能性が制限されます。最近の研究では、臨床使用のためのMSCの拡大のためにFBSをヒト血小板溶解物（HPL）に置き換えることを推奨しましたが、拡大した細胞の機能能力は部分的にしか調査されていません。10％FBSおよび他の2つの商用FBS含有培地（MesencultおよびMesenpro）を10％HPL含有培地と比較して、MSCの拡大と免疫調節をサポートする能力を発揮しました。HPLがin vitroでMSCの増殖と拡大を維持したことを実証します。ただし、回収された累積細胞数は、メセンプロ培地で得られた細胞数と同等でした。さらに、HPLがいくつかの関連するMSC表面分子、すなわちDNAM-1リガンドPVRおよびネクチン-2、NKG2DリガンドULBP3、接着分子CD49Dおよびαvβ3、およびフィブロブブラスト関連タンパク質の発現を変化させることを示しています。さらに、HPLで培養されたMSCは、AloantigenおよびNK細胞増殖および細胞毒性に対するT細胞増殖に対する阻害能力障害を示しました。最後に、IL-6、IL-8、およびRANTES分泌がアップレギュレートされた一方で、構成的PGE2産生の減少を示しました。これらの結果は、臨床応用で免疫調節因子として使用されるMSCの拡大のためのHPLの使用におけるいくつかの制限を意味します。

The use of fetal bovine serum (FBS) for the culture and expansion of mesenchymal stromal cells (MSCs) limits their possible clinical applications. Although some recent studies recommended substituting FBS with human platelet lysate (HPL) for the expansion of MSCs for clinical use, the functional capacity of the expanded cells has only been partially explored. 10% FBS and two other commercial FBS-containing media (MesenCult and MesenPro) were compared with 10% HPL-containing medium for their ability to support MSCs expansion and immunomodulation. We demonstrate that HPL sustained MSC proliferation and expansion in vitro. However, the cumulative cell numbers recovered were comparable with those obtained in MesenPro medium. Moreover, we show that HPL alters the expression of some relevant MSC surface molecules, namely the DNAM-1 ligands PVR and Nectin-2, the NKG2D ligand ULBP3, the adhesion molecules CD49d and αvβ3 and the fibroblast-associated protein. In addition, MSCs cultured in HPL displayed impaired inhibitory capacity on T-cell proliferation to alloantigen and NK-cell proliferation and cytotoxicity. Finally, they showed decreased constitutive PGE2 production while IL-6, IL-8 and RANTES secretion were upregulated. These results imply some limitations in the use of HPL for the expansion of MSCs to be used as immunomodulators in clinical applications.