乳酸菌分離株におけるマクロライド耐性と抗生物質に対する耐性のin vitro選択

抗生物質に対する耐性の広がりは、多発性病原体の分離速度が増加するため、大きな懸念事項です。共生細菌は病原体に対する耐性の決定因子を伝達する可能性があるため、耐性の発達に関する研究には乳酸菌も含まれるべきです。マクロライド、ペニシリン、およびテトラサイクリンに対する耐性は、明らかに健康なボランティアの糞から分離されたラクトバチルス酸性菌、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルスクリスパトゥス、およびラクトバチルスcaseiの40分離株で測定されました。4×および8×MICの濃度でのこれらの抗生物質への連続暴露後の突然変異の頻度と感受性の変化を、感受性分離株で評価しました。後天性抵抗は、前選択値に関して少なくとも4回のMIC値の増分として定義されました。マクロライドおよび/またはテトラサイクリンに対する耐性は、それぞれ14および4分の分離株で同定されました。23S RRNAのERMB遺伝子とA2058G変異は、マクロライド耐性分離株で検出されました。感受性分離株の突然変異の頻度（n = 26）は、テトラサイクリンよりもアンピシリンとエリスロマイシンの方が低かった。抗生物質への連続暴露は、耐性変異体の選択につながりました。しかし、後天性耐性はかなり不安定であり、ほとんどの変異体で抗生物質を含まない培地のサブカルチャーの後に失われました。エリスロマイシンに対する耐性は、23S rRNAのA2058G変異に関連していました。結論として、結果は、マクロライドとテトラサイクリンに対する耐性が腸乳酸菌に存在することを示しています。抗生物質への連続暴露後の感受性の低下は、乳酸菌でひずみおよび抗生物質依存性の方法で発生する可能性があります。ラクトバシリはプロバイオティクスとしてよく使用されるため、プロバイオティクスベースの製品に含まれる分離株候補について耐性を獲得する能力を評価する必要があります。

Spreading of resistance to antibiotics is of great concern due to the increasing rate of isolation of multiresistant pathogens. Since commensal bacteria may transfer determinants of resistance to pathogens, studies on development of resistance should include also lactobacilli. Resistance to macrolides, penicillins and tetracycline was determined in 40 isolates of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus crispatus, and Lactobacillus casei isolated from faeces of apparently healthy volunteers. Frequency of mutation and changes in susceptibility after serial exposure to these antibiotics at concentrations of 4× and 8× MIC were evaluated in susceptible isolates. Acquired resistance was defined as an increment in MIC values of at least four times in respect to the pre-selection values. Resistance to macrolides and/or tetracycline was identified in 14 and 4 isolates, respectively. ermB gene and A2058G mutation in 23S rRNA were detected in macrolide resistant isolates. Frequencies of mutation of susceptible isolates (n=26) were lower for ampicillin and erythromycin than for tetracycline. Serial exposure to antibiotics led to selection of resistant mutants. However, acquired resistance was rather unstable and was lost after subcultures in antibiotic-free medium in most mutants. Resistance to erythromycin was associated to a A2058G mutation in 23S rRNA. In conclusion, results indicate that resistance to macrolides and tetracycline is present among intestinal lactobacilli. Decrease in susceptibility following serial exposure to antibiotics might occur in lactobacilli, in a strain- and antibiotic-dependent way. Since lactobacilli are often used as probiotics, their ability to acquire resistance should be evaluated for isolates candidate to be included in probiotics based products.