良性および悪性甲状腺病変におけるAKT1の発現、局在、およびリン酸化

セリン/スレオニンプロテインキナーゼAktは、ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ経路の重要な分子であり、しばしばヒト癌で過剰に活性化されます。3つのAktアイソフォーム（Akt1、Akt2、Akt3）がヒト細胞で同定されており、異なる分布を示し、非冗長機能を持っています。この研究の目的は、ヒト甲状腺悪性病変におけるAKT1アイソフォームの発現、リン酸化、および局在が良性病変のものと異なるかどうかを判断することでした。核および細胞質画分を組織サンプルから分離し、両方の細胞画分でAKT1の存在を検出するためにウエスタンブロット法を使用しました。Akt1式は、ELISAメソッドによっても評価されました。AKT1リン酸化を推定するために、キナーゼを細胞溶解物から免疫沈降させ、抗ホスホ-AKT抗体で試験しました。甲状腺癌サンプルの大部分におけるAKT1発現は、良性病変よりも有意に高かった（P <0.05）。分化した癌（濾胞および乳頭）と良性病変の両方におけるAkt1は、主に細胞質画分に局在していました。3つの未分化癌サンプルのうち2つでは、Akt1は主に核に局在していました。リン酸化AKT1と総AKT1の比率は、非腫瘍性病変や腺腫よりも癌の方が低かった。したがって、AKT1は甲状腺腫瘍で過剰発現しているように見えますが、その高いリン酸化は甲状腺がんには特徴的ではありません。

The serine/threonine protein kinase Akt is a key molecule in the phosphatidyl inositol 3-kinase pathway that is often overactivated in human cancers. Three Akt isoforms (Akt1, Akt2, Akt3) have been identified in human cells and they show different distribution and have non-redundant functions. The aim of this study was to determine whether the expression, phosphorylation, and localization of Akt1 isoform in human thyroid malignant lesions are different from those in benign lesions. Nuclear and cytoplasmic fractions were isolated from tissue samples and Western blot method was used to detect Akt1 presence in both cellular fractions. Akt1 expression was also assessed by ELISA method. To estimate Akt1 phosphorylation, kinase was immunoprecipitated from cell lysates and tested with anti-phospho-Akt antibodies. The Akt1 expression in majority of thyroid cancer samples was significantly higher than in benign lesions (p < 0.05). Akt1 both in differentiated cancers (follicular and papillary) and benign lesions was localized mainly in cytoplasmic fraction. In two of three anaplastic cancer samples Akt1 was predominantly localized in nucleus. The ratio of phosphorylated Akt1 to total Akt1 was lower in cancers than in non-neoplastic lesions and adenomas. Thus, although Akt1 seems to be overexpressed in thyroid neoplasms, its high phosphorylation is not characteristic for thyroid cancers.