液体クロマトグラフィー/高解像度の正確な質量分析を使用した血漿中の標的定量的生体分析：重質分解能と抽出ウィンドウの関数としてのグローバル選択性の評価、重心とプロファイルモードの比較

タンデム質量分析（LC/MS/MS/MS/MS）。したがって、薬物動態研究で最も一般的に使用されるマトリックスである血漿中の薬物の定量に関連するLC/HRMSの理論的および実用的な側面を調査しました。HRMSの全体的な選択性を評価するために、LC/MS/MSバイオ分析に通常使用されているクロマトグラフィー条件下でのLC/HRMSシステムを使用して、アセトニトリルプレシピテートされたブランクヒト血漿抽出物を分析することにより、内因性プラズマ成分からの潜在的な干渉を評価しました。プロファイルモードと重心モードの両方で10 Kおよび20 Kの分解電力を使用した総イオンクロマトグラム（TICS）。各チックから、異なる質量抽出ウィンドウ（MEWS）を使用して153個のモデル薬物の[M + H]（ +）イオンの正確な質量の抽出イオンクロマトグラム（EICS）を生成し、それぞれで検出されたプラズマ内因性ピークの数を決定しました。eic。より高い分解能、より狭いMEW、および重心モードを使用して、内因性ピークが少なくなります。20 K分解能は、血漿中の薬物の選択的決定に適していると考えることができます。希望の分析物EIC選択性を実現し、同時に分析物EICピークの欠落データポイントを回避するために、使用したMEWは幅が広すぎたり狭すぎたりしないでください。。指定されたクロマトグラフィーおよびサンプルの準備条件の下で、メソッド開発中に最適なMEWを確立することをお勧めします。一般に、最適なMEWは、20 K分解能の電力で通常≤±20 ppmであるが、重心モードと比較した場合、プロファイルモードでは小さくなります。

There is a growing interest in exploring the use of liquid chromatography coupled with full-scan high resolution accurate mass spectrometry (LC/HRMS) in bioanalytical laboratories as an alternative to the current practice of using LC coupled with tandem mass spectrometry (LC/MS/MS). Therefore, we have investigated the theoretical and practical aspects of LC/HRMS as it relates to the quantitation of drugs in plasma, which is the most commonly used matrix in pharmacokinetics studies. In order to assess the overall selectivity of HRMS, we evaluated the potential interferences from endogenous plasma components by analyzing acetonitrile-precipitated blank human plasma extract using an LC/HRMS system under chromatographic conditions typically used for LC/MS/MS bioanalysis with the acquisition of total ion chromatograms (TICs) using 10 k and 20 k resolving power in both profile and centroid modes. From each TIC, we generated extracted ion chromatograms (EICs) of the exact masses of the [M + H](+) ions of 153 model drugs using different mass extraction windows (MEWs) and determined the number of plasma endogenous peaks detected in each EIC. Fewer endogenous peaks are detected using higher resolving power, narrower MEW, and centroid mode. A 20 k resolving power can be considered adequate for the selective determination of drugs in plasma. To achieve desired analyte EIC selectivity and simultaneously avoid missing data points in the analyte EIC peak, the MEW used should not be too wide or too narrow and should be a small fraction of the full width at half maximum (FWHM) of the profile mass peak. It is recommended that the optimum MEW be established during method development under the specified chromatographic and sample preparation conditions. In general, the optimum MEW, typically ≤ ±20 ppm for 20 k resolving power, is smaller for the profile mode when compared with the centroid mode.