レンチウイルスベクターをエンコードするhtertペプチドをトランスフェクトした樹状細胞は、in vitroで抗腫瘍T細胞応答を増強します

HIV-1由来のレンチウイルスベクター（LV）は、遺伝子送達のための強力なツールとして浮上しています。HTERTは、潜在的な樹状細胞（DC）ワクチンを開発する理想的な腫瘍関連抗原です。この研究の目的は、HTERTペプチドの組換えレンチウイルスベクターを構築し、in vitroでhtert-lentivirusベクターをトランスフェクトしたDCSによって誘発されるHTERT特異的細胞毒性Tリンパ球応答を決定することでした。HTERTペプチドをコードするLVを構築し、臍帯血からのDCを調製し、その形態を観察し、表現型をフローサイトメトリーによって分析しました。Lenti-HtertをDCにトランスフェクトして、DCワクチンを構築しました。DCワクチンとHEPG2細胞（HTERT+）または293T細胞（HTERT-）で刺激されたTリンパ球は、それぞれ24時間共培養されました。同種Tリンパ球の増殖とこれらのDCによって活性化されたCTLの殺害活性を刺激する能力は、MTT法を使用して決定されました。結果によると、組換えベクターのLenti-HtertとLenti-Htert-DCワクチンが正常に構築されました。同種Tリンパ球反応におけるLenti-Htert DCの刺激能力は、DC対照群と比較して著しく増強されました（P <0.01）。Lenti-Htert-DCS（CTLT）で刺激されたCTLSのHEPG2細胞の阻害率は、コントロールDCグループ（CTLN）で刺激されたCTLよりも有意に高かった（P <0.01）。CTLTおよびCTLNの293T細胞の阻害速度は低く、異なるDCグループ間に差はありませんでした（P> 0.05）。HTERTペプチドをトランスフェクトしたDCは、in vitroでより強力なHTERT固有のCTL応答を引き出すことができました。私たちのデータは、Lenti-Htert-DCが癌免疫療法の効果的なアプローチとして潜在的に使用される可能性があることを示しています。

HIV-1 derived lentiviral vectors (LVs) have emerged as a powerful tool for gene delivery. hTERT is an ideal tumor-associated antigen with which to develop a potential dendritic cell (DC) vaccine. The purpose of this study was to construct a recombinant lentivirus vector of the hTERT peptide and to determine the hTERT-specific cytotoxic T lymphocyte response elicited by DCs transfected with hTERT-lentivirus vectors in vitro. LVs encoding the hTERT peptide were constructed, DCs from cord blood were prepared, their morphology was observed and phenotype was analyzed by flow cytometry. Lenti-hTERT was transfected into DCs to construct the DC vaccines. T lymphocytes stimulated with DC vaccines and HepG2 cells (hTERT+) or 293T cells (hTERT-) were co-cultured for 24 h, respectively. The ability to stimulate proliferation of allogeneic T lymphocytes and the killing activity of CTLs activated by these DCs were determined using the MTT method. According to our results, the recombinant vector lenti-hTERT and lenti-hTERT-DC vaccine were successfully constructed. The stimulatory capacity of the lenti-hTERT DCs in the allogeneic T lymphocyte reaction was markedly enhanced compared with the DC control group (P<0.01). Inhibition rates in HepG2 cells of CTLs stimulated with lenti-hTERT-DCs (CTLT) were significantly higher than CTLs stimulated with the control DC group (CTLN) (P<0.01). Inhibition rates in 293T cells of CTLT and CTLN were low and there was no difference between the different DC groups (P>0.05). DCs transfected with the hTERT peptide were capable of eliciting a stronger hTERT-specific CTL response in vitro. Our data indicate that lenti-hTERT-DCs may potentially be used as an effective approach for cancer immunotherapy.