グリコヒドラーゼβ-ヘキソサミニダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼは、ジュルカットTリンパ球の脂質微小骨材と関連しています

増え続ける証拠は、原形質膜などのリソソーム外酵素の存在を示唆しています。過去には、リソソームとは異なる細胞コンパートメントに作用するグリコヒドラーゼにはほとんど注意が払われていませんでしたが、グリコシルトランスフェラーゼと一緒に、グリコン酸塩化脂肪脂質のオリゴサクリド修飾プロセスプロセスプロセスプロセスプロセスに関与する必要があるため、血漿膜関連グリコヒドラーゼに関心が高まっています。および/または生理学的および病理学的条件の両方における細胞環境相互作用。培養線維芽細胞の原形質膜におけるβ-ヘキソサミニダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼの存在の以前の証拠から始まったところ、ここで、これらのグリコヒドロラーゼとジュルカットT-リンパ球の脂質微小筋との関連を調査しました。モノシアログランライオスサイドGM3は、T細胞血漿膜の主要なグリコリンゴ脂質成分を表し、その量はT細胞刺激後に大きく増加します。β-ヘキソサミニダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼは、広範囲のグリココンジュゲートから特異的なβ結合末端残基を切断し、特にGM1のGM3ガングリオシドへの段階的な分解に関与しています。ここでは、Jurkat T-Cellのシグナル伝達タンパク質LCKとの完全に処理された血漿膜関連β-ヘキソサミニダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼの共有と共免疫沈降を実証しました。さらに、ユルカット細胞刺激は、リソソームβ-ヘキソサミニダーゼとβ-ガラクトシダーゼの発現と活性を上方制御し、脂質マイクロドメインへの標的を増加させます。血漿膜関連β-ヘキソサミニダーゼとβ-ガラクトシダーゼの非ランダム分布と脂質マイクロドメイン内のそれらの局在は、グリコリンゴ脂質ベースのシグナル伝達単位の局所再編成におけるこれらの酵素の役割を示唆しています。

Growing evidence suggests the presence of active lysosomal enzymes in extra-lysosomal compartments, such as the plasma membrane. Although in the past little attention was paid to glycohydrolases acting on cellular compartments different from lysosomes, there is now increasing interest on plasma membrane-associated glycohydrolases because they should be involved, together with glycosyltransferases, in glycosphingolipids oligosaccharide modification processes regulating cell-to-cell and/or cell-environment interactions in both physiological and pathological conditions. Starting from the previous evidence of the presence of β-hexosaminidase and β-galactosidase at the plasma membrane of cultured fibroblasts, we here investigated the association of these glycohydrolases with lipid microdomains of Jurkat T-lymphocytes. Monosialoganglioside GM3 represents the major glycosphingolipid constituent of T-cell plasma membrane and its amount largely increases after T-cell stimulation. β-hexosaminidase and β-galactosidase cleave specific β-linked terminal residues from a wide range of glycoconjugates and in particular are involved in the stepwise degradation of GM1 to GM3 ganglioside. Here we demonstrated that fully processed plasma membrane-associated β-hexosaminidase and β-galactosidase co-distribute with the lipid microdomain markers and co-immunoprecipitate with the signalling protein lck in Jurkat T-cell. Furthermore, Jurkat cell stimulation up-regulates the expression and activity of lysosomal β-hexosaminidase and β-galactosidase and increases their targeting to lipid microdomains. The non-random distribution of plasma membrane-associated β-hexosaminidase and β-galactosidase and their localization within lipid microdomains, suggest a role of these enzymes in the local reorganization of glycosphingolipid-based signalling units.