樹状細胞表面の受容体を標的とするビオチン化抗体を備えたストレプトアビジン融合抗原の複合体：特定のT細胞免疫応答を誘導するための新しいツール

専門的なAg-Presenting細胞（APC）による処理および提示のために、外因性抗原（AG）の効率的なターゲティングを可能にするツールの選択は、依然として限られています。これは、実際には、特定のT細胞応答を誘導するワクチンの開発におけるボトルネックを表しています。ここでは、APCSへのAG分娩の新しい戦略について説明します。選択したAGは、ストレプトアビジン（SA）および四量体Ag-SAまたはSA-AG融合タンパク質のNまたはC末端に融合し、大腸菌で生成され、2-イミノビオチン - アガロースアフィニティクロマトグラフィーによって精製されます。あるいは、Ag-SAタンパク質は、大腸菌封入体の尿素抽出物から精製され、in vitroで機能的なテトラマーに改良されます。細胞表面受容体を標的とするビオチン化抗体を含む複合体が形成され、APCによる処理と提示のために選択したAGを送達し、in vitroおよびin vivoでのAg特異的CD4+およびCD8+ T細胞応答の誘導を提供します。

The choice of tools that enable efficient targeting of exogenous antigens (Ag) for processing and presentation by professional Ag-presenting cells (APC) remains limited. This represents, indeed, a bottleneck in development of vaccines inducing specific T-cell responses. Here, we describe a novel strategy of Ag delivery into APCs. The Ag of choice is fused to the N- or C-terminus of streptavidin (SA) and tetrameric Ag-SA or SA-Ag fusion proteins are produced in E. coli and purified by 2-Iminobiotin-Agarose affinity chromatography. Alternatively, Ag-SA proteins are purified from urea extracts of E. coli inclusion bodies and refolded in vitro into functional tetramers. Complexes with biotinylated antibodies targeting cell surface receptors are formed and used to deliver the Ags of choice for processing and presentation by APCs and induction of Ag-specific CD4+ and CD8+ T-cell responses in vitro and in vivo.