単純ヘルペスウイルスおよびバキュロウイルスベースの方法によって生成されるアデノ関連ウイルスベクターによる線条体および皮質組織の形質導入

組換えアデノ関連ウイルス（AAV）ベクトルは、重要な臨床的約束を実証した治療遺伝子産物をコードする遺伝物質を運ぶように設計することができます。これらのウイルスベクターは、通常、AAV REPおよびCAP遺伝子、アデノウイルスヘルパー遺伝子、および関心のある遺伝子をコードする2つまたは3つのプラスミドの一時的なトランスフェクションによって哺乳類細胞で産生されます。この方法では、複数の精製プロトコルで使用すると高品質のAAVベクターを生成できますが、1つの重要な制限は、製造の拡大の難しさです。これは、AAVベクターの広範な臨床利用に大きなハードルをもたらします。この課題に対処するために、組換えヘルペスシンプレックスウイルスI型（RHSV-1） - および組換えバキュロウイルス（RBAC）ベースの方法が最近確立されました。これらの方法は、哺乳類細胞の一時的なトランスフェクションを使用した方法よりも、AAVベクターの大規模な産生に適しています。RHSV-1またはRBACベースのプラットフォームによって生成されたAAVベクターの潜在的なアプリケーションを調査するために、ラット脳内のRHSV-1またはRBACが生成したAAV血清型2（AAV2）ベクトルのin vivo導入を、それらをベクトルと比較することにより調べました。従来のトランスフェクション法によって生成されます。RHSV-1またはRBACで生成されたAAVベクターをラット線条体および皮質組織に注入すると、過渡型導入によって生成されるAAV2ベクターと比較して、細胞熱帯（すなわち、主に神経標的）または前症の拡散に違いは明らかになりませんでした。このレポートは、特に中枢神経系に治療分子を提供するための、RHSV-1およびRBACベースのシステムによって生成されたAAVベクターを有望なツールとして検証するためのステップを表しています。

Recombinant adeno-associated virus (AAV) vectors can be engineered to carry genetic material encoding therapeutic gene products that have demonstrated significant clinical promise. These viral vectors are typically produced in mammalian cells by the transient transfection of two or three plasmids encoding the AAV rep and cap genes, the adenovirus helper gene, and a gene of interest. Although this method can produce high-quality AAV vectors when used with multiple purification protocols, one critical limitation is the difficulty in scaling-up manufacturing, which poses a significant hurdle to the broad clinical utilization of AAV vectors. To address this challenge, recombinant herpes simplex virus type I (rHSV-1)- and recombinant baculovirus (rBac)-based methods have been established recently. These methods are more amenable to large-scale production of AAV vectors than methods using the transient transfection of mammalian cells. To investigate potential applications of AAV vectors produced by rHSV-1- or rBac-based platforms, the in vivo transduction of rHSV-1- or rBac-produced AAV serotype 2 (AAV2) vectors within the rat brain were examined by comparing them with vectors generated by the conventional transfection method. Injection of rHSV-1- or rBac-produced AAV vectors into rat striatum and cortex tissues revealed no differences in cellular tropism (i.e., predominantly neuronal targeting) or anteroposterior spread compared with AAV2 vectors produced by transient transfection. This report represents a step towards validating AAV vectors produced by the rHSV-1- and the rBac-based systems as promising tools, especially for delivering therapeutic molecules to the central nervous system.