[in vitroでのラットのカルバリアル骨芽細胞の増殖、分化、成熟に対するイカリアインの影響]

目的：ラットのカルバリアル骨芽細胞の増殖、分化、成熟に対するイカリアインの影響を調査する（ROB）。 方法：ROBを得るために、除卵性新生児SDラットの頭蓋骨、酵素消化。培地は3日ごとに交換されました。セルが80％の培養皿で覆われたときに、連続亜積栽培が進みました。Icariinは、それぞれ1 x 10（-4）、1 x 10（-5）、1 x 10（-6）、1 x 10（-7）mol/Lの培養に加えられました。MTTメソッドは、増殖分析で採用されました。ALPの活動は、9日間の誘導後にアッセイされました。最適な濃度イカリアインを培地に加え、その後、鉱化骨結節、CFU-F（ALP）を含む骨形成分化マーカーを、イカリアイン添加基とコントロールの間で比較しました。総RNAを分離し、Runx-2およびOsterixの遺伝子発現をリアルタイムRT-PCRによって調査しました。総タンパク質も分離され、コラーゲンIの分泌は西部のブロットによって検査されました。 結果：ROBの増殖は、用量依存的にIcariinによって阻害されました。しかし、それは明らかに骨形成プロセスと成熟につながった。1 x 10（-5）mol/lが最良の濃度でした。Icariinは、コラーゲンI、CFU-F（ALP）量、および鉱化結節の分泌を大幅に改善しました。また、Runx-2とOsterixのmRNAレベルを強化しました。 結論：1 x 10（-5）mol/Lの最終濃度のイカリアインは、ROBの骨形成分化と成熟を大幅に高めることができ、Icariinが骨形成を誘導する活性を持っていることを示唆しているため、新しいものに発展する可能性があります。抗腫症の薬物。

OBJECTIVE: To investigate the effects of icariin on the proliferation, differentiation and maturation of rat calvarial osteoblasts (ROB). METHODS: Segregated neonatal SD rat skull,enzyme digestion to obtain ROB. The culture medium was replaced every three days. Serial subcultivation proceeded when cells covered with 80% culture dish. Icariin was added into the culture at 1 x 10(-4), 1 x 10(-5), 1 x 10(-6), 1 x 10(-7) mol/L respectively. MTT method was adopted in proliferation analysis. The activity of ALP was assayed after 9 days' induced. Optimal concentration icariin was added into the medium, then the osteogenic differentiation markers including mineralized bone nodules, CFU-F(ALP) were compared between the icariin-added group and the control. Total RNA was isolated and the gene expressions of Runx-2 and Osterix were investigated by Real Time RT-PCR. Total protein was also isolated and the secretion of collagen I was examined by Western-blot. RESULTS: The ROB proliferation was inhibited by icariin in a dose-dependent manner. But it evidently led to osteogenic process and maturation. 1 x 10(-5) mol/L was the best concentration. Icariin improved the secretion of collagen I, CFU-F(ALP) amounts and mineralized nodules significantly. It also enhanced the mRNA level of Runx-2 and Osterix. CONCLUSION: The icariin with final concentration of 1 x 10(-5) mol/L can enhance the osteogenic differentiation and maturation of ROB significantly, suggesting that icariin has the activity of inducing bone formation, it has the potential to be developed into a new drug of anti-osteoporosis.