プロテインキナーゼ卵巣癌細胞の移動と浸潤には活性と固定が必要です

上皮卵巣癌（EOC）は、その臨床的にオカルト転移の一部であるため、婦人科の悪性腫瘍の中で最も致命的です。したがって、EOCの普及と浸潤を支配するメカニズムを理解することは、抗測定療法の新しい標的または転移性疾患の検出のための新しい方法を提供する可能性があります。cAMP依存性プロテインキナーゼ（PKA）は、しばしばEOCで調節不全になります。さらに、A-キナーゼアンカータンパク質（AKAP）によるPKA活性と細胞内局在は、細胞骨格ダイナミクスと細胞移動の重要な調節因子です。したがって、EOC細胞の移動と浸潤の両方において、PKAおよびAKAP機能の役割を研究しようとしました。血漿膜指向のPKAバイオセンサー、PMAKAR3、および改善された移動/浸潤アッセイを使用して、PKAがSKOV-3 EOC細胞の移動の最先端で活性化され、PKA活性の阻害がSKOV-3細胞移動をブロックすることを示します。さらに、これらの細胞の先端内のPKA活性は、II型調節PKAサブユニット（RII）の固定によって媒介されるが、RIまたはRII PKAサブユニットのアンカーの阻害が細胞の移動をブロックすることを示しています。重要なことに、PKA活性は、3次元細胞外マトリックスの浸潤中にSKOV-3細胞の最先端でPKA活性がアップレギュレートされ、移動に見られるように、どちらのPKA活性の阻害も示していることを示しています。またはAKAPを介したPKAアンカーブロックマトリックス侵攻。これらのデータは、癌細胞による細胞外マトリックスの侵入が侵襲性のリーディングエッジ内でPKAの活性化を誘発し、PKA活性とアンカーの両方がマトリックスの浸潤に必要であることを最初に示しています。これらの観察結果は、EOC転移におけるPKAおよびAKAP活性の役割を示唆しています。

Epithelial ovarian cancer (EOC) is the deadliest of the gynecological malignancies, due in part to its clinically occult metastasis. Therefore, understanding the mechanisms governing EOC dissemination and invasion may provide new targets for antimetastatic therapies or new methods for detection of metastatic disease. The cAMP-dependent protein kinase (PKA) is often dysregulated in EOC. Furthermore, PKA activity and subcellular localization by A-kinase anchoring proteins (AKAPs) are important regulators of cytoskeletal dynamics and cell migration. Thus, we sought to study the role of PKA and AKAP function in both EOC cell migration and invasion. Using the plasma membrane-directed PKA biosensor, pmAKAR3, and an improved migration/invasion assay, we show that PKA is activated at the leading edge of migrating SKOV-3 EOC cells, and that inhibition of PKA activity blocks SKOV-3 cell migration. Furthermore, we show that while the PKA activity within the leading edge of these cells is mediated by anchoring of type-II regulatory PKA subunits (RII), inhibition of anchoring of either RI or RII PKA subunits blocks cell migration. Importantly, we also show--for the first time--that PKA activity is up-regulated at the leading edge of SKOV-3 cells during invasion of a three-dimensional extracellular matrix and, as seen for migration, inhibition of either PKA activity or AKAP-mediated PKA anchoring blocks matrix invasion. These data are the first to demonstrate that the invasion of extracellular matrix by cancer cells elicits activation of PKA within the invasive leading edge and that both PKA activity and anchoring are required for matrix invasion. These observations suggest a role for PKA and AKAP activity in EOC metastasis.