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目的と設計：この研究では、インターロイキン（IL）-3の生物学的活性を活用して、患者培養培養における炎症誘発性免疫応答を調べるために、腹膜マスト細胞の高収量を生成します。 材料または被験者：C57BL/6マウスの腹膜空洞からマスト細胞が得られました。 治療：マウスをIL-3（40-50μg/mL）で5日間1日2回腹腔内注射して、マスト細胞数を増加させました。 方法：組織学的研究では、腹膜腔、腸、肺、脾臓、骨格筋のマスト細胞数を調べました。エクスビボ（PCMC）を培養した腹膜マスト細胞は、リポ多糖およびボルデテラ百日咳抗原と腫瘍壊死因子因子α、IL-6、IL-4、IL-5、IL-10、およびインターフェロン-γの分泌をcommerce膜エリザによって測定して24時間刺激しました。FCεRI、C-KIT、OX40L、およびTLR2の細胞表面マーカー発現は、フローサイトメトリーによって測定されました。マスト細胞脱顆粒は、β-ヘキソサミニダーゼアッセイを使用して測定されました。 結果：IL-3治療は、腹膜腔、脾臓、筋肉のマスト細胞数を増加させますが、C57BL/6マウスの腸と肺は腹部ではありません。IL-3処理マウスから生成されたPCMCは、サイトカイン分泌の減少と細胞表面マーカーの発現によって測定されるように、活性化に対する成長の障害、分化、および活性化に対する反応を示します。 結論：IL-3処理マウスから培養されたマスト細胞は、反応障害を示します。
目的と設計：この研究では、インターロイキン（IL）-3の生物学的活性を活用して、患者培養培養における炎症誘発性免疫応答を調べるために、腹膜マスト細胞の高収量を生成します。 材料または被験者：C57BL/6マウスの腹膜空洞からマスト細胞が得られました。 治療：マウスをIL-3（40-50μg/mL）で5日間1日2回腹腔内注射して、マスト細胞数を増加させました。 方法：組織学的研究では、腹膜腔、腸、肺、脾臓、骨格筋のマスト細胞数を調べました。エクスビボ（PCMC）を培養した腹膜マスト細胞は、リポ多糖およびボルデテラ百日咳抗原と腫瘍壊死因子因子α、IL-6、IL-4、IL-5、IL-10、およびインターフェロン-γの分泌をcommerce膜エリザによって測定して24時間刺激しました。FCεRI、C-KIT、OX40L、およびTLR2の細胞表面マーカー発現は、フローサイトメトリーによって測定されました。マスト細胞脱顆粒は、β-ヘキソサミニダーゼアッセイを使用して測定されました。 結果：IL-3治療は、腹膜腔、脾臓、筋肉のマスト細胞数を増加させますが、C57BL/6マウスの腸と肺は腹部ではありません。IL-3処理マウスから生成されたPCMCは、サイトカイン分泌の減少と細胞表面マーカーの発現によって測定されるように、活性化に対する成長の障害、分化、および活性化に対する反応を示します。 結論：IL-3処理マウスから培養されたマスト細胞は、反応障害を示します。
OBJECTIVE AND DESIGN: This study exploits the biological activity of interleukin (IL)-3 to generate high yields of peritoneal mast cells ex vivo in order to examine pro-inflammatory immune responses in ex-vivo culture. MATERIAL OR SUBJECTS: Mast cells were obtained from the peritoneal cavity of C57BL/6 mice. TREATMENT: Mice were injected intraperitoneally twice per day for 5 days with IL-3 (40-50 μg/ml) to increase mast cell numbers. METHODS: Histological studies examined mast cell numbers in the peritoneal cavity, intestine, lung, spleen and skeletal muscle. Peritoneal mast cells cultured ex vivo (PCMCs) were stimulated for 24 h with lipopolysaccharide and Bordetella pertussis antigen and secretion of tumour necrosis factor-α, IL-6, IL-4, IL-5, IL-10 and interferon-γ into supernatant was measured by commercial ELISA. Cell surface marker expression of FcεRI, c-kit, OX40L and TLR2 was measured by flow cytometry. Mast cell degranulation was measured using a β-hexosaminidase assay. RESULTS: IL-3 treatment increases mast cell numbers in the peritoneal cavity, spleen and muscle but not intestine and lung of C57BL/6 mice. PCMCs generated from IL-3-treated mice exhibit impaired growth, differentiation and responses to activation as measured by decreased cytokine secretion and cell surface marker expression. CONCLUSION: Mast cells cultured from IL-3-treated mice show impaired responses.
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