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魚類マトリックス生物学に関する知識は、水産養殖における最適な魚の品質、 - 育種、および健康を確保するために重要です。養殖業界は、炎症や奇形などのマトリックス生物学に関連する大きな課題に直面しています。リアルタイムPCR、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティングにより、コラーゲンI、デコリン、ビッグサン、およびルミカンの発現と分布について、大西洋タラの骨格筋が調査されました。フィブロモジュリンに加えて、これらのプロテオグリカンのグリコサミノグリカン側鎖に対する抗体を使用して、免疫組織化学染色と西部免疫ブロットティングも実施しました。リアルタイムPCRは、ルミカンおよびコラーゲンIの最高のmRNA発現を示しました。コラーゲンIおよびプロテオグリカン免疫組織化学染色は、筋膜に蓄積された密な構造に染色されたフィブロモジュリンを除き、筋膜の異なる糸のような構造を明らかにしました。コンドロイチナーゼのAC生成エピトープは、CABC生成エピトープよりも制限されており、COD筋肉のコンドロイチン硫酸塩よりも硫酸デルマタンの存在が強いことを示しています。ルミカンとケラタン硫酸塩の分布パターンは、子宮内膜とミオコマタで強く、遍在していました。ウエスタンブロットは、哺乳類から知られているように、CODの同様のSLRPSサイズを明らかにしました。ウエスタンブロットにおけるコンドロイチン/硫酸デルマタン硫酸エピトープの染色は、分子サイズがデコリンおよびビッグサンの染色と類似していたが、硫酸ケラタンの染色は、予想される分子サイズのルミカンとフィブロモジュリンと一致した。結論として、LumicanはCOD筋肉の主要なプロテオグリカンであり、硫酸ケラタンと遍在する分布を備えていました。他のロイシンが豊富なプロテオグリカンもCOD筋肉に存在し、哺乳類種のために開発された抗体を使用したウエスタンブロットは、魚と交差反応性を示し、哺乳類のように同様の構造と分子量を示しました。
魚類マトリックス生物学に関する知識は、水産養殖における最適な魚の品質、 - 育種、および健康を確保するために重要です。養殖業界は、炎症や奇形などのマトリックス生物学に関連する大きな課題に直面しています。リアルタイムPCR、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティングにより、コラーゲンI、デコリン、ビッグサン、およびルミカンの発現と分布について、大西洋タラの骨格筋が調査されました。フィブロモジュリンに加えて、これらのプロテオグリカンのグリコサミノグリカン側鎖に対する抗体を使用して、免疫組織化学染色と西部免疫ブロットティングも実施しました。リアルタイムPCRは、ルミカンおよびコラーゲンIの最高のmRNA発現を示しました。コラーゲンIおよびプロテオグリカン免疫組織化学染色は、筋膜に蓄積された密な構造に染色されたフィブロモジュリンを除き、筋膜の異なる糸のような構造を明らかにしました。コンドロイチナーゼのAC生成エピトープは、CABC生成エピトープよりも制限されており、COD筋肉のコンドロイチン硫酸塩よりも硫酸デルマタンの存在が強いことを示しています。ルミカンとケラタン硫酸塩の分布パターンは、子宮内膜とミオコマタで強く、遍在していました。ウエスタンブロットは、哺乳類から知られているように、CODの同様のSLRPSサイズを明らかにしました。ウエスタンブロットにおけるコンドロイチン/硫酸デルマタン硫酸エピトープの染色は、分子サイズがデコリンおよびビッグサンの染色と類似していたが、硫酸ケラタンの染色は、予想される分子サイズのルミカンとフィブロモジュリンと一致した。結論として、LumicanはCOD筋肉の主要なプロテオグリカンであり、硫酸ケラタンと遍在する分布を備えていました。他のロイシンが豊富なプロテオグリカンもCOD筋肉に存在し、哺乳類種のために開発された抗体を使用したウエスタンブロットは、魚と交差反応性を示し、哺乳類のように同様の構造と分子量を示しました。
Knowledge on fish matrix biology is important to ensure optimal fish -quality, -growth and -health in aquaculture. The aquaculture industry face major challenges related to matrix biology, such as inflammations and malformations. Atlantic cod skeletal muscle was investigated for collagen I, decorin, biglycan, and lumican expression and distribution by real-time PCR, immunohistochemical staining and Western blotting. Immunohistochemical staining and Western immunoblotting were also performed using antibodies against glycosaminoglycan side chains of these proteoglycans, in addition to fibromodulin. Real-time PCR showed highest mRNA expression of lumican and collagen I. Collagen I and proteoglycan immunohistochemical staining revealed distinct thread-like structures in the myocommata, with the exception of fibromodulin, which stained in dense structures embedded in the myocommata. Chondroitinase AC-generated epitopes stained more limited than cABC-generated epitopes, indicating a stronger presence of dermatan sulfate than chondroitin sulfate in cod muscle. Lumican and keratan sulfate distribution patterns were strong and ubiquitous in endomysia and myocommata. Western blots revealed similar SLRPs sizes in cod as are known from mammals. Staining of chondroitin/dermatan sulfate epitopes in Western blots were similar in molecular size to those of decorin and biglycan, whereas staining of keratan sulfate epitopes coincided with expected molecular sizes of lumican and fibromodulin. In conclusion, lumican was a major proteoglycan in cod muscle with ubiquitous distribution overlapping with keratan sulfate. Other leucine-rich proteoglycans were also present in cod muscle, and Western blot using antibodies developed for mammalian species showed cross reactivity with fish, demonstrating similar structures and molecular weights as in mammals.
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