アポ-E HDLC（コレステロール誘発リポタンパク質）および低密度リポタンパク質のヒト線維芽細胞への結合のための速度と平衡定数：APO-E HDLCの複数の受容体結合の証拠

競合結合アッセイは、エポタンパク質（Apo-E HDL（C））のみを含むコレステロール誘発イヌリポタンパク質が、ヒト低密度リポタンパク質（LDL）と同じ細胞表面受容体に結合することを実証しました。ただし、APO-E HDL（C）は、LDLよりもはるかに大きな結合活性を持っています。この強化された受容体結合活性のメカニズムを決定するために、平衡および運動結合研究を4度Cで実施しました。データに基づいて、LDLとAPO-E HDLの両方の結合（C）は単純な二分子受容体相互作用であると思われ、受容体部位間の結合部位や協調効果の不均一性は観察されませんでした。APO-E HDL（c）（k（d）= 0.12 x 10（-9）10（-9）m）およびLDL（k（d）= 2.8 x 10（-9）の平衡結合データのハチャード分析によって決定される平衡解離定数m）受容体に対するHDL（c）の23倍のより大きな親和性を明らかにしました。リポタンパク質受容体複合体の関連および解離速度定数は、さまざまなリポタンパク質濃度での結合の時間経過から決定されました。これらの運動データから計算された平衡解離定数は、Apo-E HDL（c）がLDLよりも受容体に対してはるかに高い親和性を持っていることが確認されました。さらに、運動学的研究では、APO-E HDL（c）は、それぞれ18.0 x 10（4）および5.5 x 10（4）m（-1）秒（-1）の関連率でLDLよりも迅速に結合することが示されました。APO-E HDL（C）受信器複合体（1.7 x 10（-5）秒（-1））の解離速度は、LDL受容体複合体のそれよりも遅くなりました（6.3 x 10（-5）秒（ - 1））。Apo-E HDL（C）とLDLの結合との間の追加の重要な違いは、最大結合での受容体の飽和にHDL（C）粒子と同様の多くのLDL粒子が4倍（3.6 +/- 0.4）でした。これらのデータは、各HDL（C）粒子がLDL受容体結合の比率4：1で複数の細胞表面受容体に結合することを示しています。

Competitive binding assays have demonstrated that a cholesterol-induced canine lipoprotein containing only the E apoprotein (apo-E HDL(c)) binds to the same cell surface receptors of human fibroblasts as human low density lipoproteins (LDL). However, the apo-E HDL(c) have a much greater binding activity than LDL. Equilibrium and kinetic binding studies were conducted at 4 degrees C to determine the mechanism for this enhanced receptor binding activity. Based on the data, the binding of both LDL and apo-E HDL(c) appears to be a simple bimolecular receptor interaction, and no heterogeneity of binding sites or cooperative effects among the receptor sites were observed. Equilibrium dissociation constants determined by Scatchard analysis of the equilibrium binding data for apo-E HDL(c) (K(d) = 0.12 x 10(-9) M) and LDL (K(d) = 2.8 x 10(-9) M) revealed a 23-fold greater affinity of HDL(c) for the receptors. Association and dissociation rate constants for the lipoprotein-receptor complex were determined from the time course of binding at various lipoprotein concentrations. The equilibrium dissociation constants calculated from these kinetic data confirmed that apo-E HDL(c) had a much higher affinity for the receptor than LDL. Furthermore, the kinetic studies indicated that apo-E HDL(c) bound more rapidly than LDL with rates of association of 18.0 x 10(4) and 5.5 x 10(4) M(-1) sec(-1), respectively. The rate of dissociation of the apo-E HDL(c)-receptor complex (1.7 x 10(-5) sec(-1)) was slower than that of the LDL receptor complex (6.3 x 10(-5) sec(-1)). An additional important difference between the binding of apo-E HDL(c) and LDL was that 4 times (3.6 +/- 0.4) as many LDL particles as HDL(c) particles were required for saturation of the receptors at maximal binding. These data indicate that each HDL(c) particle binds to multiple cell surface receptors at a ratio of 4:1 for LDL receptor binding.