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Methods in enzymology20120101Vol.503issue()

研究から治療までのアンキリンリピートタンパク質(Darpins)を設計した

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

設計されたアンキリンリピートタンパク質(DARPIN)は、結合タンパク質の堅牢で多用途の足場に開発されています。高親和性バインダーは、リボソームディスプレイとファージディスプレイによって日常的に選択されます。Darpinsは臨床試験に参加し、安定性と堅牢な折りたたみにより、多くの新しい分子形式を可能にしたため、研究で多くの用途を発見しました。Darpinの特性を要約し、いくつかの生物医学的アプリケーションを強調します。プロトコルは、染料とポリエチレングリコールでの標識、速度論および熱力学による細胞表面受容体への結合を定量的に測定し、非自然なアミノ酸を使用して「Click Chemistry」の使用から新しいエンジニアリングの機会を利用するために与えられます。

設計されたアンキリンリピートタンパク質(DARPIN)は、結合タンパク質の堅牢で多用途の足場に開発されています。高親和性バインダーは、リボソームディスプレイとファージディスプレイによって日常的に選択されます。Darpinsは臨床試験に参加し、安定性と堅牢な折りたたみにより、多くの新しい分子形式を可能にしたため、研究で多くの用途を発見しました。Darpinの特性を要約し、いくつかの生物医学的アプリケーションを強調します。プロトコルは、染料とポリエチレングリコールでの標識、速度論および熱力学による細胞表面受容体への結合を定量的に測定し、非自然なアミノ酸を使用して「Click Chemistry」の使用から新しいエンジニアリングの機会を利用するために与えられます。

Designed ankyrin repeat proteins (DARPins) have been developed into a robust and versatile scaffold for binding proteins. High-affinity binders are routinely selected by ribosome display and phage display. DARPins have entered clinical trials and have found numerous uses in research, due to their high stability and robust folding, allowing many new molecular formats. We summarize the DARPin properties and highlight some biomedical applications. Protocols are given for labeling with dyes and polyethylene glycol, for quantitatively measuring binding to cell surface receptors by kinetics and thermodynamics, and for exploiting new engineering opportunities from using "click chemistry" with nonnatural amino acids.

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