修飾されていない転写RNAのコドン読み取り特性

以前に、マイコプラズママイコイドグリシンTRNA（アンチコドンUCC）が、古典的なコドンリーディングルールに違反してコドンGGUとGGCを効果的に読み取ることを示しました。このTRNA分子の構造要素がこの翻訳特性を付与するものを解明しようとしました。この調査の過程で、対応する遺伝子のT7 RNAポリメラーゼ転写を使用して、修飾されたヌクレオシドを欠くTRNAを生成しました。in vitro翻訳システムを使用して、このtRNAが4つのグリシンコドン（GGU、GGC、およびGGG）を読み取る能力をテストし、4つのコドンすべての読み取りで通常の完全に修正されたカウンターパートと同じくらい効率的であることが示されました。この結果は、修飾ヌクレオシドを欠いているtRNAがin vitroでタンパク質合成を効率的に維持できることを示しており、さらに、マイコプラズマグリシンtRNAの正常な修飾パターンは、このtRNAがグリシンコドンGGUとGGCを読む能力に不可欠ではないことを示しています。効果的に。

We have previously shown that the Mycoplasma mycoides glycine tRNA (anticodon UCC) effectively reads the codons GGU and GGC in violation of the classic codon reading rules. We have attempted to elucidate what structural elements in this tRNA molecule confer this translational property and in the course of this investigation T7 RNA polymerase transcription of the corresponding gene was used to produce a tRNA devoid of modified nucleosides. Using an in vitro translation system the ability of this tRNA to read the 4 glycine codons (GGU, GGC, and GGG) was tested and it was shown to be as efficient as its normal, fully modified counterpart in the reading of all four codons. This result demonstrates that a tRNA devoid of modified nucleosides is able to efficiently sustain protein synthesis in vitro and, furthermore, that the normal modification pattern of the Mycoplasma glycine tRNA is not essential for the ability of this tRNA to read the glycine codons GGU and GGC effectively.