確立された犬の腎臓上皮細胞株（MDCK）における分化特性の保持

組織培養で成長したマディン・ダービー犬腎臓（MDCK）細胞は、遠位尿細管上皮細胞の形態学的特性を持ち、密着し、いくつかの近位尿細管酵素マーカーを欠いています。これらの細胞のアデニル酸シクラーゼは、バソプレシン、オキシトシン、プロスタグランジンE1およびE2、グルカゴン、およびコレラ毒素によって刺激されました。分離膜調製におけるホルモン刺激アデニル酸シクラーゼ活性は、GTPの低濃度に依存しており、腎臓酵素にMGCL2およびPH Optimaが予想されていました。結果は、環状AMPによって誘導されるヘミシスト形成の強化の実証と同様に、MDCK細胞株が腎臓上皮細胞の分化特性を維持していることを示唆しています。MDCK細胞を赤ちゃんヌードマウスに注入すると、成人期が達成されるまで連続結節の成長が観察されました。組織学的研究により、2つの細胞タイプの存在が明らかになりました。固体結節腫瘤の80〜90％を含む正常なマウス線維芽細胞と、内部液で充填された腺を裏打ちする上皮シートを形成したMDCK細胞です。電子顕微鏡分析により、細胞の粘膜表面は、腺の内腔に面した微小型によって特徴付けられ、隣接するMDCK細胞は密着した接合部によって結合され、上皮シートの漿膜表面は滑らかなプラズマ膜によって特徴付けられていることが示されました。連続的な基底膜が並んでいます。これらの観察結果は、MDCK細胞が原形質膜の局所分化とin vivoで腎臓尿細管のような構造を再生する能力を保持しているという結論につながります。

Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells grown in tissue culture have the morphological properties of distal tubular epithelial cells, form tight junctions, and lack several proximal tubular enzyme markers. Adenylate cyclase in these cells was stimulated by vasopressin, oxytocin, prostaglandins E1 and E2, glucagon, and cholera toxin. Hormone-stimulated adenylate cyclase activity in isolated membrane preparations was dependent on low concentrations of GTP and had the MgCl2 and pH optima expected for the kidney enzyme. The results, as well as the demonstration of enhanced hemicyst formation induced by cyclic AMP, suggest that the MDCK cell line has retained the differentiated properties of the kidney epithelial cell of origin. When MDCK cells were injected into baby nude mice, continuous nodule growth was observed until adulthood was attained. Histological studies revealed the presence of two cell types: normal mouse fibroblasts which comprise 80--90% of the solid nodule mass, and MDCK cells, which formed epithelial sheets lining internal fluid-filled glands. Electron microscope analysis showed that the mucosal surfaces of the cells were characterized by microvilli which faced the lumen of the glands, that adjacent MDCK cells were joined by tight junctions, and that the serosal surfaces of the epithelial sheets were characterized by smooth plasma membranes which were lined by a continuous basement membrane. These observations lead to the conclusion that the MDCK cells retain regional differentiation of their plasma membranes and the ability to regenerate kidney tubule-like structures in vivo.