N-メチル-N'-ニトロ-N-ニトロソグアニジン誘導DNA配列変化。アルキル化変異誘発における非ランダム成分

DNAの分子性がどのように変異部位の挙動を調節するかについての研究への私たちのアプローチには、変異の分布の特性評価が含まれます。Escherichia coli Laci Genetic/M13クローニングシステムにより、多数のサイトでの基本置換周波数の比較が可能になります。N-メチル-N'-ニトロ-N-ニトロソグアニジン（MNNG）誘導G：C ---- A：T遷移（主要なイベント）、およびA：T --- G：C遷移の観察された分布（比較的まれなイベント）、驚くほど非ランダムです。g：c ---- A：t変異の一部の部位は、最も感受性の低い部位よりもMNNGによって変異するのがほぼ100倍近くです。ただし、突然変異の部位は、一連の可変性を示すものではなく、5 'の隣接ベースによって厳密に区切られる可能性があります。発生の頻度が高いサイトは、共通のシーケンスモチーフ、すなわち5'-R-G-N-3 'を共有しています。この定義された部位の特異性の結果は、MNNG誘発性LACI-D変異に鎖バイアスがないことです。特異的または非固有のアルキル化修復システムの可用性は、突然変異の分布を変化させるようには見えません。これは、観察された変異分布が初期損傷分布の直接的な反映であることを示唆しています。MNNGは、変異誘発のランダム成分と非ランダム成分の両方を示す紫外線または4-ニトロキノリン-N-酸化物に類似したそのクラスの化合物に属していません。

Our approach to the study of how the molecular nature of DNA modulates the behavior of mutational sites involves the characterisation of distributions of mutations. The Escherichia coli lacI genetic/M13 cloning system allows the comparison of base substitution frequencies at a large number of sites. The observed distribution of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG)-induced G:C----A:T transition (the predominant event), and A:T----G:C transition (a relatively rare event), is strikingly non-random. Some sites of G:C----A:T mutation are almost 100 times more often mutated by MNNG than the least susceptible sites. Sites of mutation, however, do not display a continuum of mutability, but rather can be strictly demarcated by their 5' flanking base. Sites with a high frequency of occurrence share a common sequence motif, namely 5'-R-G-N-3', which is the sole apparent feature that distinguishes them from sites less commonly mutated (i.e. 5'-Y-G-N-3'). A corollary of this defined site specificity is the absence of a strand bias in MNNG-induced lacI-d mutation. The availability of specific or non-specific alkylation-repair systems does not appear to alter the distribution of mutation, which suggests that the observed mutational distribution is a direct reflection of the initial damage distribution. MNNG does not belong to that class of compounds typified by ultraviolet light or 4-nitroquinoline-N-oxide which exhibit both random and non-random components of mutagenesis.