慢性肉芽腫性疾患の遺伝子治療

食細胞NADPHオキシダーゼの変異はCGDを引き起こし、再発性感染症と肉芽腫性炎症を引き起こします。造血幹細胞（HSC）移植はCGDを治すことができますが、ほとんどの患者は適切なドナーを欠いています。不治の感染症のX連鎖CGD（X-CGD）患者の3人の患者のサルベージ療法として、ex vivo自己HSC遺伝子導入の臨床試験を実施しました。患者は非髄膜媒介性ブスルファンコンディショニングを受け、その後、角球菌MFGS-GP91Phoxマウスレトロウイルスベクター移動性HSCを注入し、循環好中球の24％、5％、4％の早期遺伝子マークと高レベルのオキシダーゼ機能補正をもたらしました。被験者＃1および＃3は完全に解消され、5年で0.7％および0.03％のオキシダーゼ正常好中球で遺伝子マークを維持しています。被験者＃2は、4週間で6か月で遺伝子マーキングを失い、感染症に屈しました。2人の生き残った被験者は、通常の血液数と骨髄検査を受けており、ベクターインサートのクローン優位性の証拠はありません。私たちは、従来の治療に反応しない重度の感染の遺伝子治療のサルベージ治療は、適切なドナーを欠くCGD患者に命を救う臨床的利益をもたらす可能性があると結論付けています。私たちは、CGDの次世代遺伝子治療のためのレンティブ因子を開発しています。また、CGD患者に由来する誘導多能性幹細胞の亜鉛フィンガーヌクレアーゼ媒介遺伝子標的化を使用した遺伝子治療への新しい代替アプローチを調査しています。

Mutations in phagocyte NADPH oxidase cause CGD, resulting in recurrent infections and granulomatous inflammation. Hematopoietic stem cell (HSC) transplant can cure CGD, but most patients lack a suitable donor. We conducted a clinical trial of ex vivo autologous HSC gene transfer as salvage therapy for three patients with X-linked CGD (X-CGD) who had incurable infection. Patients received nonmyeloablative busulfan conditioning and then were infused with amphotropic MFGS-gp91phox murine retrovirus vector-transduced autologous HSC, resulting in early gene marking and high-level oxidase function correction of 24%, 5%, and 4% of circulating neutrophils. Subjects #1 and #3 fully resolved infection and have maintained gene marking at 5 years at 0.7% and 0.03% oxidase-normal neutrophils. Subject #2 lost gene marking by 4 weeks and at 6 months succumbed to his infection. The two surviving subjects have normal blood count and bone marrow exam, with no evidence for clonal dominance of vector inserts. We conclude that gene therapy salvage treatment for severe infection unresponsive to conventional therapy can provide life-saving clinical benefit to CGD patients lacking a suitable donor. We are developing lentivectors for our next generation gene therapy of CGD. We are also exploring novel alternate approaches to gene therapy using zinc finger nuclease-mediated gene targeting of induced pluripotent stem cells derived from CGD patients.