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エレクトロスプレーイオン化を用いた敏感な液体クロマトグラフィータンデム質量分析（LC-MS/MS）法は、シトクロムP450（CYP）のin vivo活性を評価するための5つのプローブ薬とその代謝物の同時定量のために開発されました。CYPアイソフォーム特異的基質とCYP1A2（カフェイン）、CYP2C9（ロサルタン）、CYP2C19（オメプラゾール）、CYP2D6（デキストロメトルファン）、CYP3A（Midazolam）の代謝物は、LC-MS/MSの投与を使用してLC-MS/MSの投与後にLC-MSを使用して同時に分析されました。（つまり、「カクテルアプローチ」）健康なボランティアへ。アッセイは、内部標準としてプロプラノロールを使用します。二重液体抽出;Xbridge MS C（18）（100 mm×2.1mm、3.5μm）カラム。0.1％ギ酸/アセトニトリルの勾配移動相（7/3→3/7）;正のイオンモードでの質量分析検出。この方法は、カフェインおよびパラクシンチンで5〜500 ng/ml、ロサルタンおよびExp3174で0.1-40 ng/ml、オメプラゾールで0.05-20 ng/ml、5-ヒドロキシメスプラゾール、0.008-0.8 ng/mlでデクストロメソルファンおよびDextrorphanの場合は検証されました。、ミダゾラムでは0.01-1.0 ng/ml、1'-ヒドロキシミダゾラムでは0.04-4 ng/ml。すべての分析物の濃度範囲にわたる日中および日間精度は、12.5％と13.8％（相対標準偏差、％RSD）よりも低く、精度はそれぞれ86.5％から108.4％、それぞれ87.0％から107.0％でした。。この非常に敏感で定量的な方法により、典型的な治療用量の10〜100倍低い投与量を投与された被験者の薬物動態学的研究が可能になりました。
エレクトロスプレーイオン化を用いた敏感な液体クロマトグラフィータンデム質量分析（LC-MS/MS）法は、シトクロムP450（CYP）のin vivo活性を評価するための5つのプローブ薬とその代謝物の同時定量のために開発されました。CYPアイソフォーム特異的基質とCYP1A2（カフェイン）、CYP2C9（ロサルタン）、CYP2C19（オメプラゾール）、CYP2D6（デキストロメトルファン）、CYP3A（Midazolam）の代謝物は、LC-MS/MSの投与を使用してLC-MS/MSの投与後にLC-MSを使用して同時に分析されました。（つまり、「カクテルアプローチ」）健康なボランティアへ。アッセイは、内部標準としてプロプラノロールを使用します。二重液体抽出;Xbridge MS C（18）（100 mm×2.1mm、3.5μm）カラム。0.1％ギ酸/アセトニトリルの勾配移動相（7/3→3/7）;正のイオンモードでの質量分析検出。この方法は、カフェインおよびパラクシンチンで5〜500 ng/ml、ロサルタンおよびExp3174で0.1-40 ng/ml、オメプラゾールで0.05-20 ng/ml、5-ヒドロキシメスプラゾール、0.008-0.8 ng/mlでデクストロメソルファンおよびDextrorphanの場合は検証されました。、ミダゾラムでは0.01-1.0 ng/ml、1'-ヒドロキシミダゾラムでは0.04-4 ng/ml。すべての分析物の濃度範囲にわたる日中および日間精度は、12.5％と13.8％（相対標準偏差、％RSD）よりも低く、精度はそれぞれ86.5％から108.4％、それぞれ87.0％から107.0％でした。。この非常に敏感で定量的な方法により、典型的な治療用量の10〜100倍低い投与量を投与された被験者の薬物動態学的研究が可能になりました。
A sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometric (LC-MS/MS) method with electrospray ionization was developed for the simultaneous quantitation of five probe drugs and their metabolites in human plasma for assessing the in vivo activities of cytochrome P450 (CYP). CYP isoform specific substrates and their metabolites of CYP1A2 (caffeine), CYP2C9 (losartan), CYP2C19 (omeprazole), CYP2D6 (dextromethorphan) and CYP3A (midazolam) were all simultaneously analyzed using LC-MS/MS after administration of a mixture of five drugs (i.e., a "cocktail approach") to healthy volunteers. The assay uses propranolol as an internal standard; dual liquid extraction; a Xbridge MS C(18) (100 mm × 2.1mm, 3.5 μm) column; a gradient mobile phase of 0.1% formic acid/acetonitrile (7/3→3/7); mass spectrometric detection in positive ion mode. The method was validated from 5 to 500 ng/mL for caffeine and paraxanthine, 0.1-40 ng/mL for losartan and EXP3174, 0.05-20 ng/mL for omeprazole and 5-hydroxyomeprazole, 0.008-0.8 ng/mL for dextromethorphan and dextrorphan, 0.01-1.0 ng/mL for midazolam, and 0.04-4 ng/mL for 1'-hydroxymidazolam. The intra- and inter-day precision over the concentration ranges for all analytes were lower than 12.5% and 13.8% (relative standard deviation, %RSD), and accuracy was between 86.5% and 108.4% and between 87.0% and 107.0%, respectively. This highly sensitive and quantitative method allowed a pharmacokinetic study in subjects receiving doses 10-100 times lower than typical therapeutic doses.
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