鎮痛薬α-コノトキシンによるN型（CAV22）カルシウムチャネルの阻害には、γ-アミノ酪酸型B（GABAB）受容体発現が必要です。

α-コノトキシンVC1.1およびRGIAは、海洋円錐カタツムリの毒から分離された小さなペプチドです。彼らは、神経障害性疼痛のラットモデルに効果的な抗侵害受容作用を持っています。げっ歯類の背側根神経節（DRG）の薬理学的研究は、鎮痛効果が、γ-アミノ酪酸型B（GABA（B））受容体を含む経路を介したN型（Ca（V）2.2）カルシウムチャネルの阻害によって媒介されることを示しています。ただし、鎮痛性α-コノトキシンによるCa（V）2.2チャネルの阻害には、機能性GABA（B）受容体が必要であることを示す直接的な実証はありません。この研究では、RNA干渉を使用したGABA（B）受容体の一過性ノックダウン後のカルシウムチャネル電流に対するGABA（B）アゴニストバクロフェンとα-コノトキシンVC1.1およびRGIAの効果を調べました。分離ラットDRGニューロンに、GABA（B）サブユニットR1およびR2を標的とする小さな干渉RNA（siRNA）をトランスフェクトしました。mRNAおよびタンパク質レベルでのGABA（B）受容体発現の効率的なノックダウンは、それぞれ定量的リアルタイムPCR（QRT-PCR）および免疫細胞化学分析によって確認されました。トランスフェクションの2〜4日後に実施された全細胞パッチクランプ記録により、バクロフェン、VC1.1およびRGIAに応答したN型カルシウムチャネルの阻害がGABA（B）受容体ノックダウンDRGニューロンで大幅に減少することが示されました。対照的に、スクランブルされた非標的siRNAでトランスフェクトされたニューロンは、トランスフェクトされていないニューロンと区別できませんでした。HEK 293細胞の異形発現システムでは、VC1.1およびCa（V）2.2チャネルのRGIA阻害が必要なヒトGABA（B）受容体サブユニットの機能的発現が必要でした。一緒に、これらの結果は、鎮痛薬α-コノトキシンVC1.1およびRGIAにより、N型（Ca（v）2.2）カルシウムチャネルの調節のためにGABA（b）受容体を活性化する必要があることを確認します。

α-Conotoxins Vc1.1 and RgIA are small peptides isolated from the venom of marine cone snails. They have effective anti-nociceptive actions in rat models of neuropathic pain. Pharmacological studies in rodent dorsal root ganglion (DRG) show their analgesic effect is mediated by inhibition of N-type (Ca(v)2.2) calcium channels via a pathway involving γ-aminobutyric acid type B (GABA(B)) receptor. However, there is no direct demonstration that functional GABA(B) receptors are needed for inhibition of the Ca(v)2.2 channel by analgesic α-conotoxins. This study examined the effect of the GABA(B) agonist baclofen and α-conotoxins Vc1.1 and RgIA on calcium channel currents after transient knockdown of the GABA(B) receptor using RNA interference. Isolated rat DRG neurons were transfected with small interfering RNAs (siRNA) targeting GABA(B) subunits R1 and R2. Efficient knockdown of GABA(B) receptor expression at mRNA and protein levels was confirmed by quantitative real time PCR (qRT-PCR) and immunocytochemical analysis, respectively. Whole-cell patch clamp recordings conducted 2-4 days after transfection showed that inhibition of N-type calcium channels in response to baclofen, Vc1.1 and RgIA was significantly reduced in GABA(B) receptor knockdown DRG neurons. In contrast, neurons transfected with a scrambled nontargeting siRNA were indistinguishable from untransfected neurons. In the HEK 293 cell heterologous expression system, Vc1.1 and RgIA inhibition of Ca(v)2.2 channels needed functional expression of both human GABA(B) receptor subunits. Together, these results confirm that GABA(B) receptors must be activated for the modulation of N-type (Ca(v)2.2) calcium channels by analgesic α-conotoxins Vc1.1 and RgIA.