ヒト膵臓癌細胞におけるタンポポ根抽出物による治療によるアポトーシスとオートファジーの選択的誘導

目的：膵臓癌には100％の死亡率があります。この研究の目的は、攻撃的で耐性のある膵臓癌細胞におけるアポトーシスとオートファジーの誘導におけるタンポポ根抽出物（DRE）の有効性を評価することです。 方法：DREの効果は、WST-1（4- [3-（4-ヨードフェニル）-2-（4-ニトロフェニル）-2H-5-テトラゾリオ] -1,3-ベンゼンジスルホネート）アッセイを使用して評価されました。アポトーシス細胞死は、ホスファチジルセリンのアネキシン-V結合アッセイによる血漿膜の外側のリーフレットへのホスファチジルセリンの染色および外部化による核凝縮によって確認されました。ミトコンドリア膜電位の喪失は、JC-1（5,5 '、6'-テトラクロロ-1,1'、3,3 'テトラエチルベンジミダゾリルカルボシアニンヨウ化）を使用して観察されました。オートファジーの誘導は、モノダンシルカダベリンアッセイを使用して検出され、これは軽鎖3-IIの免疫蛍光により確認されました。 結果：BXPC-3およびPANC-1膵臓細胞は、水性DREに敏感でした。この抽出物は、用量依存的および時間依存的に選択的なアポトーシスを誘導します。タンポポの根抽出物は、ミトコンドリア膜電位の崩壊を引き起こし、オートファジーを促進しました。正常なヒト線維芽細胞は、同様の用量で耐性がありました。 結論：DREは、非癌性細胞に有意な影響を及ぼさないヒト膵臓癌細胞にアポトーシスとオートファジーを誘導する可能性があることを示しています。これは、DREによる癌治療のさらなる研究を実行できる根拠を提供します。

OBJECTIVES: Pancreatic cancer has a 100% mortality rate; the aim of this study is to evaluate the efficacy of dandelion root extract (DRE) in inducing apoptosis and autophagy in aggressive and resistant pancreatic cancer cells. METHODS: The effect of DRE was evaluated using WST-1 (4-[3-(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-2H-5-tetrazolio]-1,3-benzene disulfonate) assay. Apoptotic cell death was confirmed by nuclear condensation by Hoechst staining and externalization of phosphatidylserine to the outer leaflet of the plasma membrane by Annexin-V binding assay. Loss of mitochondrial membrane potential was observed using the JC-1 (5,5',6, 6'-tetrachloro-1,1',3,3' tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide) dye. The induction of autophagy was detected using a monodansylcadaverine assay and this was confirmed by immunofluorescence for light chain 3-II. RESULTS: BxPC-3 and PANC-1 pancreatic cells were sensitive to aqueous DRE. This extract induces selective apoptosis in a dose- and time-dependent manner. Dandelion root extract caused the collapse of the mitochondrial membrane potential, leading to prodeath autophagy. Normal human fibroblasts were resistant at similar doses. CONCLUSIONS: We demonstrate that DRE has the potential to induce apoptosis and autophagy in human pancreatic cancer cells with no significant effect on noncancerous cells. This will provide a basis on which further research in cancer treatment through DRE can be executed.