Azotobacter Vinelandiiからの[NIFE]ハイドロゲーゼエンコード構造遺伝子（HOXKおよびHOXG）のクローニング、シーケンス、および特性評価

Azotobacter Vinelandii [NIFE]ハイドロゲーゼをコードする構造遺伝子は、A。vinelandiiゲノムコスミドライブラリーから分離されました。ヌクレオチド（NT）配列分析により、酵素の大小サブユニットをそれぞれコードする2つの遺伝子、HoxkとHoxGが、少なくとも1つの他の遺伝子を含むオペロンの一部を形成することが示されました。HOXK遺伝子は、358アミノ酸（AA）（39,209 DA）のポリペプチドをコードします。推定されたAAシーケンスは、精製されたA. vinelandiiヒドロゲナーゼ小さなサブユニットには存在しない可能性のある45-AA N末端拡張をコードします。これは細胞ターゲティングシーケンスである可能性があります。HOXG遺伝子は下流の形態であり、HOXKを4 ntに重複し、66,803 Daの602-AAポリペプチドをコードします。HOXKおよびHOXG遺伝子産物は、他の生物からそれぞれ、それぞれ大小のサブユニットのAAシーケンスと相同性を示します。HOXG遺伝子は、53％の非極性および11％の芳香族AAを含む27,729-DA（240-AA）疎水性ポリペプチドをコードできる3番目のオープンリーディングフレームから16 nt上流にあります。この可能性のある第三遺伝子の重要性は現在知られていません。

The Azotobacter vinelandii [NiFe]hydrogenase-encoding structural genes were isolated from an A. vinelandii genomic cosmid library. Nucleotide (nt) sequence analysis showed that the two genes, hoxK and hoxG, which encode the small and large subunits of the enzyme, respectively, form part of an operon that contains at least one other gene. The hoxK gene encodes a polypeptide of 358 amino acids (aa) (39,209 Da). The deduced aa sequence encodes a possible 45-aa N-terminus extension, not present in the purified A. vinelandii hydrogenase small subunit, which could be a cellular targeting sequence. The hoxG gene is downstream form, and overlaps hoxK by 4 nt and encodes a 602-aa polypeptide of 66,803 Da. The hoxK and hoxG gene products display homology to aa sequences of hydrogenase small and large subunits, respectively, from other organisms. The hoxG gene lies 16 nt upstream from a third open reading frame which could encode a 27,729-Da (240-aa) hydrophobic polypeptide containing 53% nonpolar and 11% aromatic aa. The significance of this possible third gene is not known at present.