Agrobacterium Tumefaciens C58からのハロアルカンデハロゲナーゼデータの結晶化と予備X線分析

ハロアルカンデハロゲノーゼは、多種多様なハロアルキル基質の加水分解反応を触媒して、対応するアルコールおよびハロゲン化水素生成物を形成する酵素です。Agrobacterium Tumefaciens C58のデータは、アスパラギンとトリプトファンの代わりに、アスパラギンとトリプトファンの代わりに、アスパラギン（ASN43）とチロシン（Tyr109）のユニークなペアを持つハロアルカンデハロゲナーゼです。データは大腸菌で表現され、0.1 M CHES pH 8.6、1.0 M TASIUMナトリウム、0.2 M硫酸リチウム、0.01 Mバリウム塩化物で構成される貯水池溶液を使用して、座位蒸気拡散法を使用して精製および結晶化しました。X線回折データは1.70Åの解像度に収集されました。結晶の空間グループは、ユニットセルパラメーターa = b = 123.7、c =88.1Åで、原始四角空間グループp422として決定されました。結晶には、非対称単位に2つの分子が含まれていました。

Haloalkane dehalogenases are enzymes that catalyze the hydrolytic reaction of a wide variety of haloalkyl substrates to form the corresponding alcohol and hydrogen halide products. DatA from Agrobacterium tumefaciens C58 is a haloalkane dehalogenase that has a unique pair of halide-binding residues, asparagine (Asn43) and tyrosine (Tyr109), instead of the asparagine and tryptophan that are conserved in other members of the subfamily. DatA was expressed in Escherichia coli, purified and crystallized using the sitting-drop vapour-diffusion method with a reservoir solution consisting of 0.1 M CHES pH 8.6, 1.0 M potassium sodium tartrate, 0.2 M lithium sulfate, 0.01 M barium chloride. X-ray diffraction data were collected to 1.70 Å resolution. The space group of the crystal was determined as the primitive tetragonal space group P422, with unit-cell parameters a = b = 123.7, c = 88.1 Å. The crystal contained two molecules in the asymmetric unit.