SCFV-FC形式でのモノクローナル抗体のクローニング、発現、および精製

このプロトコルは、シングルチェーン可変フラグメント（SCFV）-FC形式でのモノクローナル抗体の生成について説明しています。これには、SCFV-FC発現カセットの哺乳類発現ベクターへのクローニングに続いて、哺乳類細胞の一時的なトランスフェクションとタンパク質A親和性クロマトグラフィーによる精製が含まれます。このプロトコルは、ミリグラム量のタンパク質への迅速なアクセスを必要とする基本的および前臨床研究のアプリケーションを対象としています。

This protocol describes the generation of monoclonal antibodies in single-chain variable fragment (scFv)-Fc format. It includes the cloning of the scFv-Fc expression cassette into a mammalian expression vector followed by transient transfection of mammalian cells and purification by protein A affinity chromatography. The protocol is intended for applications in basic and preclinical research that require rapid access to milligram amounts of protein.